光诱导金丝桃素体外抗日本血吸虫雄虫作用的观察

作     者：蔡茹 佘新平 王瑜 龚唯 张惠琴 夏超明 CAI Ru;SHE Xin-ping;WANG Yu;GONG Wei;ZHANG Hui-qin;XIA Chao-ming

作者机构：安徽理工大学医学院病原生物学教研室淮南232001 苏州大学医学院寄生虫学教研室苏州215123 

出 版 物：《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 (Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases)

年 卷 期：2014年第32卷第3期

页      面：176-179页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室开放课题(No.WK008-001) 国家自然科学基金(No.30772027) 安徽理工大学博士基金(No.11083) 安徽理工大学国家级大学生创新创业训练计划(No.201210361114) 

主　　题：金丝桃素 日本血吸虫 抗血吸虫作用 

摘      要：目的 观察光诱导后的金丝桃素对日本血吸虫雄虫的体外杀伤作用。 方法 80只昆明小鼠经腹部皮肤感染由单只阳性钉螺逸出的日本血吸虫尾蚴60～80条，6周后剖检，收集雄虫置入含有3 ml DMEM培养液的平皿内（10条/皿）。每批次实验均分为：金丝桃素提取物或金丝桃素纯品（以下简称金丝桃素）不同浓度（0.1、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0和2.5 μmol/L）光照组以及不同浓度非光照组，二甲基亚砜（DMSO）对照组和空白对照组。各实验均重复2～5次。将金丝桃素提取物或金丝桃素纯品及DMSO液分别加入含有血吸虫的培养皿中，恒温避光共孵育6 h，再分别照射30、60、90和120 min后，37 ℃避光培养过夜（16 h）。次晨，洗涤、更换无药物新鲜培养液，继续避光培养48 h，观察光诱导后的金丝桃素对血吸虫的杀伤作用。选取1.0、2.5和5.0 μmol/L 金丝桃素光照60 min组虫体在解剖镜下观察并摄像；2.0 μmol/L金丝桃素光照60 min组虫体进行扫描电镜观察。 结果 各浓度金丝桃素纯品光照组的虫体均有不同程度的死亡，0.1 μmol/L金丝桃素纯品光照30 min组，虫体死亡率为20%；2 μmol/L金丝桃素纯品光照90 min组和2.5 μmol/L金丝桃素纯品光照60 min组，虫体均100%死亡。相应的金丝桃素纯品各浓度无光照组、DMSO对照组和空白对照组，虫体均100%存活。解剖镜下观察，1.0、2.5和5.0 μmol/L金丝桃素纯品光照60 min组虫体均出现显著的痉挛性麻痹现象，表现为不同程度的缩短卷曲、体态僵硬和活动终止等改变；扫描电镜观察，2.0 μmol/L 金丝桃素纯品光照60 min组虫体皮层出现肿胀、空泡形成、破裂、糜烂、剥落和感觉乳突丢失等损害，甚至皮层正常结构完全消失。金丝桃素纯品各浓度光照组的虫体死亡率和形态结构的损伤改变与金丝桃素浓度和光照时间有关。 结论 金丝桃素经光诱导后，具有显著的体外抗日本血吸虫雄虫作用。