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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 中国农业科学院特产研究所长春130112
出 版 物:《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)
年 卷 期:2020年第28卷第1期
页 面:63-67页
学科分类:090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:内蒙古农业大学高层次人才引进项目(NDGCC2016-22)
摘 要:为了获得牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2基因的最佳可溶性蛋白,本试验根据GenBank已公布的BVDV E2基因序列,利用DNAStar等软件进行生物信息学分析,截取抗原性和亲水性较高的序列进行稀有密码子优化,串联信号肽序列后合成并连接到原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-Opti-E2;转化至*** BL21(DE3)宿主菌,经SDS-PAGE和Western blot分析,成功获得大小为43 kDa的BVDV E2基因的最佳可溶性蛋白,且该蛋白特异性较好。本试验E2蛋白的成功表达可为后续ELISA方法的建立和亚单位疫苗的开发奠定基础。