唑来膦酸/白介素-2诱导的中国恒河猴外周血γδT细胞体外扩增

作     者：龚睿 周艳 郭晓萍 郭铭 刘金彪 庄柯 张晶 周立 GONG Rui;ZHOU Yan;GUO Xiaoping;GUO Ming;LIU Jinbiao;ZHUANG Ke;ZHANG Jing;ZHOU Li

作者机构：湖北国际旅行卫生保健中心湖北武汉430070 武汉大学动物实验中心动物生物安全三级实验室/病毒学国家重点实验室湖北武汉430071 

出 版 物：《武汉大学学报（理学版）》 (Journal of Wuhan University:Natural Science Edition)

年 卷 期：2020年第66卷第1期

页      面：81-86页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81201261,81301428和81471943) 海关总署应急技术保障专项(2018IK036) 武汉大学自主科研项目(2042015kf0188,2042018kf0034) 

主　　题：恒河猴 γδT细胞 唑来膦酸 免疫激活 

摘      要：建立了一种培养及大量扩增中国恒河猴外周血γδT细胞的方法。采用Ficoll密度梯度离心法分离中国恒河猴(rhesus macaque)外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),用含5%猴自体血清、1 000 U·mL^-1白介素-2(IL-2)和不同浓度唑来膦酸(1,5,10μmol·L^-1)的OpTmizer细胞培养基进行培养,并使用流式细胞仪进行纯度及表型分析。结果显示:使用含不同浓度唑来膦酸培养基诱导第8 d时,1μmol·L^-1和5μmol·L^-1处理组的猴γδT细胞分别扩增至总细胞的91. 4%和93. 1%;5μmol·L^-1处理组表达CD56、CD69及HLA-DR蛋白的猴γδT细胞占总细胞的比例分别为75. 6%、75. 5%以及78. 0%;5μmol·L^-1处理组表达干扰素IFN-γ的猴γδT细胞比例为84. 8%。本研究通过优化培养基的组成成分,仅添加猴自体血清和IL-2即能有效诱导猴γδT细胞在体外的大量扩增,且培养得到的猴γδT细胞能够显著表达CD56、CD69、HLADR及IFN-γ,并具有较强的免疫激活和细胞杀伤作用。