鸭α干扰素在家蚕中的表达及抗病毒活性检测

作     者：王朋 王先翔 魏珍珍 刘兴建 张志芳 李轶女 胡小元 易咏竹 Wang Peng;Wang Xianxiang;Wei Zhenzhen;Liu Xingjian;Zhang Zhifang;Li Yi􀆴nyu;Hu Xiaoyuan;Yi Yongzhu

作者机构：江苏科技大学生物技术学院江苏镇江212018 中国农业科学院生物技术研究所北京100081 

出 版 物：《蚕业科学》 (ACTA SERICOLOGICA SINICA)

年 卷 期：2019年第45卷第5期

页      面：706-712页

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家重点研发计划项目(No.2017YFD0500706) 国家自然科学基金项目(No.31670156) 

主　　题：鸭α干扰素 家蚕杆状病毒表达系统 抗病毒活性 

摘      要：鸭α干扰素(DuIFN-α)是一类具有广谱抗病毒、抗肿瘤等生物学活性的细胞因子,可用于鸭及其他家禽养殖业中各种病毒性疾病的预防和治疗。将编码鸭α干扰素的基因序列密码子优化后进行合成,再对翻译起始序列进行优化,然后将2条序列分别克隆到杆状病毒转移载体上得到pVL1393-DuIFN-α和pVL1393-DuIFN-αm,与缺失orf1629的杆状病毒reBmBac共转染家蚕卵巢细胞系,获得携带目的片段的重组病毒reBmBac-DuIFN-α和reBmBac-DuIFN-αm。用重组病毒感染5龄起蚕后从血淋巴中获得表达产物,在鸡胚细胞中采用微量细胞病变抑制法检测表达产物对VSV?GFP病毒的抑制效果。结果显示,重组DuIFN-α产物的效价可达813×10^5U/mL,重组DuIFN-αm的效价可达307×10^5U/mL;重组病毒reBmBac-DuIFN-α经筛选纯化后,表达量提高,最高效价可达(190±025)×10^6U/mL。研究结果为利用家蚕杆状病毒表达系统表达生产高抗病毒活性的重组鸭α干扰素奠定了基础。