抗犬瘟热病毒血凝素蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

作     者：赵爽爽 刘云 李彤彤 王文静 薛雨佳 刘明 ZHAO Shuang-shuang;LIU Yun;LI Tong-tong;WANG Wen-jing;XUE Yu-jia;LIU Ming

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2020年第41卷第2期

页      面：29-33页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家重点研发计划项目(2016YFD0501001) 

主　　题：犬瘟热病毒 单克隆抗体 中和活性 

摘      要：为制备抗犬瘟热病毒(CDV)血凝素蛋白的单克隆抗体,以CDV弱毒株Onderstepoort免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合制备杂交瘤细胞。用昆虫杆状病毒表达系统表达的血凝素蛋白作为ELISA包被抗原,进行杂交瘤细胞筛选,获得3株阳性杂交瘤细胞株,分别命名3A8、3E4和1C7。经鉴定,抗体均为IgG1亚型,轻链为kappa链。杂交瘤细胞培养上清中抗体效价为1∶64~1∶256,腹水中抗体效价为1∶10~5~1∶10~7,病毒中和试验表明,3E4对CDV具有中和活性,腹水中抗体中和效价为1∶512。制备的单克隆抗体为CDV感染动物的治疗和基因工程抗体的开发奠定了基础。