阳和汤对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡Egr1/p21信号通路的影响

作     者：李康乐 杨小蒨 张愉 杨硕 朱中博 窦建卫 LI Kang-le;YANG Xiao-qian;ZHANG Yu;YANG Shuo;ZHU Zhong-bo;DOU Jian-wei

作者机构：西安交通大学药学院西安710061 西安交通大学第二附属医院西安710004 甘肃中医药大学基础医学院兰州730000 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2020年第26卷第8期

页      面：62-67页

核心收录：

学科分类：1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 100501[医学-中医基础理论] 100502[医学-中医临床基础] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81573983,81873311) 陕西省中医药管理局科研课题项目(2019-ZZ-JC029) 西安市中医药科研项目(SZJ201709) 西安市中医院课题项目(YJ201915) 

主　　题：三阴性乳腺癌 MDA-MB-231细胞 阳和汤 早期生长反应基因1(Egr1) 细胞周期蛋白依赖性抑制剂(p21) 

摘      要：目的:以早期生长反应基因1(Egr1)/细胞周期蛋白依赖性抑制剂(p21)信号通路为基础,探讨古方阳和汤含药血清对人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的影响。方法:制备阳和汤大鼠含药血清,体外培养三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞。设空白组,阳和汤高、中、低剂量组(23.4,11.7,5.85 g·kg^-1),分别干预MDA-MB-231细胞24,48,72 h,细胞增殖检测(CCK-8)法检测各组细胞增殖情况。设空白组,阳和汤高、中、低剂量组(23.4,11.7,5.85 g·kg^-1),干预MDA-MB-231细胞48 h,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况以及细胞周期分布情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组细胞Egr1,p21 mRNA的表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞Egr1,p21蛋白的表达情况。结果:阳和汤干预MDA-MB-231细胞24,48,72 h,与空白组相比,阳和汤高、中剂量组能显著抑制MDA-MB-231细胞增殖(P0.01)。阳和汤干预MDA-MB-231细胞48 h,与空白组相比,阳和汤高、中剂量组细胞的凋亡率明显增加(P0.05,P0.01);阳和汤高、中剂量组细胞周期G0/G1期所占比例降低,G2/M期所占比例升高(P0.05,P0.01);阳和汤高、中剂量组细胞Egr1,p21mRNA和蛋白表达均增加(P0.05,P0.01)。结论:阳和汤可激活MDA-MB-231细胞中Egr1/p21信号通路,增加Egr1,p21的表达,引起G2/M细胞周期阻滞,从而诱导MDA-MB-231细胞凋亡。