骨形态发生蛋白4慢病毒载体构建及对鼠骨髓间充质干细胞成牙功能影响

作     者：王欢欢 胡杨 韩祥祯 邬薇薇 何惠宇 

作者机构：新疆医科大学第一附属医院口腔修复科新疆乌鲁木齐830054 

出 版 物：《口腔医学研究》 (Journal of Oral Science Research)

年 卷 期：2015年第31卷第1期

页      面：7-10,14页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 08[工学] 0836[工学-生物工程] 

基　　金：新疆维吾尔自治区科技厅科技支疆项目(编号:201291173) 

主　　题：骨形态发生蛋白4 慢病毒载体 骨髓间充质干细胞 组织工程牙 实时荧光定量PCR 

摘      要：目的:构建骨形态发生蛋白4(BMP4)慢病毒载体,检测其对鼠骨髓间充质干细胞成牙功能的影响,以期为组织工程牙筛选种子细胞。方法:以成熟人胎盘组织为材料来源,克隆人BMP4基因的全长cDNA,转克隆至plenti6/v5-D-TOPO表达载体,构建出BMP4-plenti6/v5-D-TOPO重组慢病毒表达载体;转染SD大鼠骨髓间充质干细胞,用MTT法检测转染前后细胞的增殖活性,实时荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原蛋白、成釉蛋白、牙本质基质蛋白1、同源异型盒基因1成牙相关基因的mRNA水平相对表达量的变化。结果:BMP4基因转染后,细胞体外增殖活性增强,成釉蛋白、牙本质基质蛋白1、同源异型盒基因1mRNA水平表达量增多,差异有统计学意义(P0.05),Ⅰ型胶原蛋白mRNA水平差异无显著性意义。结论:BMP4可提高骨髓间充质干细胞体外增殖活性和牙向分化能力。