YggG截短蛋白的表达及其抗体的制备

作     者：黄勇 陈苏民 陈南春 李洁 张斌 张晓楠 

作者机构：第四军医大学生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2004年第20卷第2期

页      面：171-173页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目 (No .39870 380 ) 

主　　题：YggG蛋白 截短突变体 多克隆抗体 

摘      要：目的 :在大肠杆菌中表达截短的YggG蛋白 ,并制备兔抗YggG截短体抗体。方法 :从含有大肠杆菌yggg基因全长DNA的质粒中 ,用PCR扩增截短的yggg基因序列 ,克隆入非融合表达载体pDH2中 ,构建YggG截短体的高表达工程菌 ,并温敏诱导表达非毒性的YggG蛋白 ,薄层扫描检测目的蛋白含量。免疫家兔制备兔抗YggG突变体抗血清 ,并以Western blot检测抗体效价、鉴定抗体特异性。结果 :大肠杆菌中表达的YggG截短突变体蛋白占菌体总蛋白的 3 1.7%。抗血清效价约 1∶2 0 0 0 ,Westernblot分析显示抗血清具有较高的特异性。结论 :成功地获得了YggG截短体蛋白 ,并制备了兔抗YggG突变体抗血清。