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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020
出 版 物:《中国实验血液学杂志》 (Journal of Experimental Hematology)
年 卷 期:2011年第19卷第4期
页 面:857-860页
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金:天津市自然科学基金(编号09JCZDJC17300) 高等学校博士学科点专项科研基金(编号20091106110038)
主 题:NHE1 DNA损伤 K562 HL-60 细胞凋亡
摘 要:本研究主要探讨在依托泊苷引起的DNA损伤下,BCR-ABL阳性细胞系K562中钠氢交换蛋白-1(NHE1)的表达变化情况,并初步探讨其在何种水平被调控。采用实时定量PCR技术检测NHE1在mRNA水平的表达;Western blot检测依托泊苷对细胞NHE1在蛋白水平的影响;流式细胞术测定细胞凋亡情况;构建NHE1启动子区荧光素酶报告载体,并测定不同依托泊苷浓度作用下的荧光素酶活性。结果表明:DNA损伤引起HL-60细胞NHE1在mRNA和蛋白水平升高(p0.05);依托泊苷对HL-60细胞有明显的促凋亡作用,阻止细胞内pH值的升高可以降低依托泊苷的促凋亡作用,依托泊苷对K562细胞凋亡率无明显影响;K562细胞在DNA损伤时,NHE1启动子区构建的荧光素酶表达载体活性升高。结论:依托泊苷造成的DNA损伤,促进HL-60细胞凋亡,并且依赖pHi的改变;在K562细胞中NHE1表达没有改变,但其转录活性升高。