外泌体介导miR-519c-5p增强脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡作用

作     者：黄发 吕嘉贤 许静红 姚纪友 童荔 胡晓光 朱艳平 曹璐 蔡常洁 HUANG Fa;Lü Jiaxian;XU Jinghong;YAO Jiyou;TONG Li;HU Xiaoguang;ZHU Yanping;CAO Lu;CAI Changjie

作者机构：中山大学附属第一医院广州510080 广东省器官捐献与移植免疫重点实验室广东省器官移植科技合作基地广州510080 广州市第一人民医院广州510000 

出 版 物：《实用医学杂志》 (The Journal of Practical Medicine)

年 卷 期：2020年第36卷第6期

页      面：722-728页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：广州市科技计划项目(编号:201704020153) 广东省器官捐献与移植免疫重点实验室建设项目(编号:2013A061401007) 广东省器官移植国际合作基地建设项目(编号:2015B050501002) 

主　　题：外泌体 脓毒症 凋亡 人脐带静脉内皮细胞 miRNA 

摘      要：目的探讨外泌体介导的miR-519c-5p是否能增强脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡作用。方法收集大量人脐带静脉内皮细胞(HUVECs)上清液,通过超速离心法制备大量外泌体(exosomes),制备大量无任何处理的blank-exosomes和过表达miR-519c-5p的miR-519c-5p-exosomes;同时予以LPS 10μg/mL刺激HUVECs 6 h构建脓毒症模型,再与分别与上述两种外泌体共培养12 h。实验设立3个组:HUVECs+blank-exosomes为空白组,HUVECs+LPS+blank-exosomes、HUVECs+miR-519c-5p-exosomes为对照组,HUVECs+LPS+miR-519c-5p-exosomes为实验组。通过qRT-PCR法检测miR-519c-5p在外泌体及HUVECs中的表达,通过CCK-8法与流式细胞术分别检测各组内皮细胞增殖和凋亡的情况。结果经qRT-PCR验证转染的过表达exosomes较blank-exosomes与mimic NC-exosomes miR-519c-5p表达升高约13倍(P0.001)。同时,CCK-8测得实验组OD值均低于空白组和对照组(0.458 vs.1.388,0.458 vs.0.843,P0.05),流式细胞术测得实验组细胞凋亡比例均高于空白组和对照组(7.197%vs.0.647%,P0.001;7.197%vs.3.423%,P=0.001)。结论外泌体介导的miR-519c-5p能增强脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡作用。