迟缓爱德华菌FliC-TolC融合蛋白表达及免疫特性研究

作     者：张志强 杜万年 王苗 于秀剑 田占云 刘晨 李昕甜 吴同垒 康元环 史秋梅 刘莉 ZHANG Zhi-qiang;DUWan-nian;WANG Miao;YU Xiu-jian;TIAN Zhan-yun;LIU Chen;LI Xin-tian;WU Tong-lei;KANG Yuan-huan;SHI Qiu-mei;Liu Li

作者机构：浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省鱼类健康与营养重点实验室浙江湖州313001 河北省预防兽医学重点实验室河北科技师范学院河北秦皇岛066004 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2020年第42卷第1期

页      面：18-22页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：“农业部淡水渔业健康养殖重点实验室、浙江省鱼类健康与营养重点实验室或浙江省淡水水产遗传育种重点实验室”开放基金课题(ZJK201812) 中国博士后科学基金(2017M611935) 河北科技师范学院海洋专项(2018HY007) 

主　　题：迟缓爱德华菌 FliC-TolC融合蛋白 蛋白表达 免疫保护力 

摘      要：鞭毛蛋白FliC与外膜蛋白TolC均具有免疫保护效果,其中FliC蛋白具有疫苗佐剂的特性,但目前尚未有关迟缓爱德华菌(***)FliC-TolC融合产物免疫动物的免疫效果的相关报道。为研究*** FliC-TolC融合蛋白的免疫特性,本研究利用融合PCR方法扩增获得fliC-tolC片段,构建重组载体pET-28a-fliC-tolC,并利用*** BL21表达系统表达了融合蛋白FliC-TolC。将纯化的FliC-TolC、TolC、FliC蛋白免疫小鼠后,以***强毒株攻毒评估免疫效果;并利用斑马鱼模型进行了平行试验。结果显示,本研究克隆了*** fliC-tolC基因并表达和纯化了相应重组蛋白FliC-TolC;FliC-TolC蛋白激发小鼠产生的抗体水平优于FliC、TolC蛋白单独免疫组,表明FliC-TolC蛋白具有优良的免疫原性。攻毒试验表明FliC-TolC蛋白组小鼠对强毒株可产生较好的抵抗力,相对保护率为95%;斑马鱼攻毒试验相对保护率为60%。本研究证实了***重组蛋白FliC-TolC的免疫效力,为进一步研制***亚单位疫苗提供了参考和借鉴。