青杄转录因子PwHAP5及其同源蛋白AtHAP5下游靶基因的鉴定

作     者：苗雅慧 游韩莉 郜银涛 张凌云 Miao Yahui;You Hanli;Gao Yintao;Zhang Lingyun

作者机构：森林培育与保护教育部重点实验室(北京林业大学)北京100083 

出 版 物：《东北林业大学学报》 (Journal of Northeast Forestry University)

年 卷 期：2020年第48卷第6期

页      面：6-12,16页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 090701[农学-林木遗传育种] 0907[农学-林学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：农业部转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08009003-002) 国家自然科学基金面上项目(31270663) 

主　　题：青杄 转录因子 PwHAP5 AtHAP5 HSFA2 

摘      要：利用分子生物学手段,对青杄PwHAP5及其拟南芥同源基因AtHAP5的下游调控基因进行探究,旨在丰富青杄以及拟南芥中HAP5转录因子的调控网络。通过转录激活活性分析,发现PwHAP5和AtHAP5均无转录激活活性。两个酵母单杂交体系(pHis2和pAbAi体系酵母单杂交实验)显示A37、HSFA2启动子全长、只含有CCAAT box的区域均不能与PwHAP5和AtHAP5直接结合。EMSA试验结果表明,AtHAP5与A37和HSFA2启动子在体外不能直接结合;单(双)荧光素酶试验结果表明,AtHAP5对HSFA2具有负调控作用,但对A37表达无影响。通过RT-qPCR试验检测在异源过表达OE-PwHAP5植株中预测靶基因的表达量,结果显示A37与HSFA2相对表达量均无显著变化,而在同源过表达植株OE-AtHAP5中,HSFA2的相对表达量下降。这些结果显示AtHAP5在体内负调控HSFA2表达,而PwHAP5在进化上与AtHAP5的功能存在差异。