2种腺相关病毒介导的增强型绿色荧光蛋白对人成纤维细胞转染效率的研究

作     者：郑钧丰 孔永 葛良鹏 魏泓 ZHENG Jun-feng;KONG Yong;GE Liang-peng;WEI Hong

作者机构：第三军医大学基础医学部实验动物学教研室重庆400038 西南大学生命科学院重庆400017 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2008年第30卷第12期

页      面：1111-1113页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：国家“十五”科技攻关计划重点项目(2004BA717B23) 

主　　题：腺相关病毒 人皮肤成纤维细胞 增强型绿色荧光蛋白 流式细胞 

摘      要：目的比较2种不同腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的增强型绿色荧光蛋白对人皮肤成纤维细胞(human fibroblast,HFB)的转染效率。方法原代分离培养人皮肤成纤维细胞并鉴定,按照感染复数(multiple of in-fection,MOI)为104、105、106转染传2代的人成纤维细胞,流式细胞检测AAV2-EGFP和AAV2/1-EGFP对HFB的转染效率,倒置荧光显微镜观察转染后的荧光强度。MTT法检测AAV2-EGFP和AAV2/1-EGFP对HFB的毒性。结果腺相关病毒AAV2-EGFP对HFB的转染效率随着MOI增加而增高,MOI为104时转染效率为(7.68±1.18)%,当MOI达到105后,转染效率稳定在(22.16±5.59)%,随着MOI增加,最高至MOI 106转染效率无显著提高。而病毒AAV2/1对于HFB的转染效率在MOI为106转染效率仅为(3.47±0.93)%。2种病毒在转染过程中,细胞生长正常,MTT显示各转染组与未转染组的吸光度值无统计学差异。结论AAV2载体对体外培养的HFB转染效率高于AAV2/1,但2种病毒载体对人皮肤成纤维细胞转染效率均不高,AAV2/1-EGFP对HFB几乎无感染能力。