沙眼衣原体pORF5质粒蛋白单克隆抗体2H4的纯化及其免疫学特性研究

作     者：李忠玉 吴移谋 黄秋林 粟盛梅 周洲 陈超群 周辉 钟光明 LI Zhong-yu;WU Yi-mou;SU Sheng-mei;ZHOU Zhou;CHEN Chao-qun;ZHOU Hui

作者机构：南华大学医学院微生物学与免疫学教研室衡阳421001 南华大学第一附属医院普外科 美国德克萨斯大学健康科学中心 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2011年第31卷第11期

页      面：1041-1045页

核心收录：

学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30970165、81102230) 湖南省自然科学基金(09JJ3059) 湖南省高校科技创新团队资助项目(湘教通[20103212号) 

主　　题：沙眼衣原体 pORF5质粒蛋白 单克隆抗体 免疫学特性 

摘      要：目的 纯化抗沙眼衣原体pORF5单克隆抗体2H4并鉴定其免疫学特性.方法 大量培养pORF5单克隆抗体阳性杂交瘤细胞株并收集培养上清,采用G蛋白免疫亲和层析法纯化2H4单克隆抗体；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定2H4效价及抗体亚类；Western blot鉴定其特异性；免疫荧光试验（IFA）检测2H4单克隆抗体的衣原体种属特异性.结果 纯化后2H4抗体的纯度高达93％；效价为1：1024,免疫球蛋白类型为IgG2a;2H4抗体不仅能特异性识别pORF5融合蛋白,而且能特异性识别Ct血清型A、D、L2、鼠农原体（MoPn）、鹦鹉热嗜农原体（6BC）质粒所编码的内源性pORF5蛋白,但不识别衣原体其他质粒蛋白和肺炎嗜衣原体（Cpn）.结论 获得了高纯度的能特异识别pORF5质粒蛋白的单克隆抗体,为进一步研究pORF5蛋白结构和功能以及沙眼衣原体诊断试剂盒的研制奠定了良好的基础.