奶牛乳房炎相关链球菌PCR检测方法的建立

作     者：王丽君 陈伟 张利莉 Li-jun Li-li WANG Li-jun;CHEN Wei;ZHANG Li-li

作者机构：新疆兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室新疆阿拉尔843300 新疆兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2010年第42卷第10期

页      面：7-10页

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(30860018) 新疆生产建设兵团博士资金专项(2009JC07) 

主　　题：奶牛乳房炎 猪链球菌 PCR检测方法 革兰阳性球菌 磷酸甘油醛脱氢酶 基因序列设计 PCR方法 Streptococcus 特异性 生化鉴定 革兰阴性杆菌 序列分析 牛链球菌 PCR扩增 PCR产物 引物 条带 特点 菌株 结果 

摘      要：利用编码3-磷酸甘油醛脱氢酶的gapC基因具有高度特异性的特点,建立PCR方法鉴定与奶牛乳房炎相关的链球菌。根据已有gapC基因序列设计1对引物,以分离自患乳房炎奶牛乳样的10株革兰阳性球菌、10株革兰阳性杆菌、10株革兰阴性杆菌作为待检菌株,进行PCR扩增。结果表明,在10株革兰阳性球菌中,有8株球菌可以扩增出约1011bp的目的条带,而其他2株革兰阳性球菌及20株杆菌均无相应PCR产物出现。通过传统的生化鉴定与16S rDNA序列分析相结合证实,能扩出gapC基因的8株革兰阳性球菌分别为乳房链球菌(Streptococcus uberis)、牛链球菌(***)与猪链球菌(***)。说明基于gapC基因的PCR方法,用于鉴定奶牛乳房炎相关链球菌具有较强的特异性。