不同浓度米诺环素对人胶质瘤细胞增殖、自噬、凋亡的影响及其机制

作     者：韩利民 严婉约 李巧巧 李科 刘丽 赵海龙 HAN Li-min;YAN Wan-yue;LI Qiao-qiao;LI Ke;LIU Li;ZHAO Hai-long

作者机构：遵义医科大学病理生理学教研室563000 遵义医科大学第一临床学院 

出 版 物：《天津医药》 (Tianjin Medical Journal)

年 卷 期：2020年第48卷第9期

页      面：801-806,I0001页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31701007) 贵州省教育厅青年科技人才成长项目(2017-198) 贵州省大学生创新创业训练计划(201710661042) 

主　　题：米诺环素 神经胶质瘤 细胞增殖 细胞凋亡 自噬 AMP活化蛋白激酶类 沉默信息调节因子2相关酶1 

摘      要：目的探讨不同浓度米诺环素对人类胶质瘤U87和LN229细胞增殖及凋亡的影响和作用机制。方法(1)U87和LN229细胞设对照组(DMSO处理),5μmol/L米诺环素组和10μmol/L米诺环素组,分组处理72 h后采用MTT法检测细胞增殖水平,免疫荧光标记检测细胞自噬蛋白微管相关蛋白l轻链3B亚基(LC3B)表达水平,Western blot法检测细胞自噬和凋亡相关蛋白的表达变化。(2)构建沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)-shRNA载体,观察敲低SIRT1表达后,不同浓度米诺环素对U87和LN229细胞自噬的影响。结果(1)与对照组相比,5μmol/L和10μmol/L米诺环素组细胞增殖能力下降,免疫荧光标记显示胞浆内自噬标记蛋白LC3B的表达增多,Western blot结果显示哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)水平显著降低,自噬基因相关蛋白5(Atg5)、磷酸化AMP依赖的蛋白激酶α亚基(p-AMPKα)、SIRT1水平显著增加(P0.05)。(2)敲低SIRT1表达后,shSIRT1组mTOR和LC3B表达水平较对照组明显下降;而经过米诺环素处理后,mTOR的表达出现明显升高,而LC3B表达水平仅部分恢复。结论5、10μmol/L的米诺环素均能有效抑制人类胶质瘤U87和LN229细胞的生长,其机制可能与AMPK/SIRT1通路诱导细胞自噬和p70s6k/Bcl-2通路诱导细胞凋亡有关。