突变型α-突触核蛋白对大鼠原代培养神经元突起生长作用研究

作     者：王鹏 许洁 李昕 何欣 李尧华 于顺 WANG Peng;XU Jie;LI Xin;HE Xin;LI Yao-hua;YU Shun

作者机构：北华大学基础医学院人体解剖学教研室吉林132013 吉林化工学院理学院吉林132022 首都医科大学宣武医院老年病研究所神经生物学研究室北京100053 

出 版 物：《首都医科大学学报》 (Journal of Capital Medical University)

年 卷 期：2012年第33卷第5期

页      面：629-633页

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(30271437 30270482) 北京市自然科学基金项目(7022011) 吉林省教育厅"十二五"科学技术研究项目 吉教科合字[(2012)-137] 

主　　题：突触核蛋白 原代神经元培养 突起生长 帕金森病 

摘      要：目的观察人α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)和其突变体A30P和A53T对大鼠原代培养神经元突起生长的影响,明确α-Syn的生理功能,揭示突变体A30P和A53T在帕金森病的发病机制中的作用。方法取大鼠大脑皮质神经元分组培养,在细胞外添加A30P、A53T和α-Syn,培养1 h、2 h和4 h后固定,比较A30P、A53T与α-Syn对神经元突起生长的影响。神经元突起以成像显微镜观察测量,Western blotting法、免疫荧光法、单克隆抗体阻断实验鉴定各蛋白作用的特异性。结果添加α-Syn组的神经元培养至1、2和4 h时,其突起的平均长度大于对照组和添加A30P、A53T组(P0.05)。增加蛋白的含量,浓度越高,α-Syn组神经元突起的平均长度与添加A30P和A53T组差异越大(P0.01)。Western blotting和免疫荧光实验明确了外源性α-Syn可以从培养基进入到神经元内,并均匀分布在胞体和突起。而A30P和A53T组,并未发现。结论α-Syn在原代神经元生长初期对其突起生长具有促进作用,突变体A30P和A53T,无促神经元突起生长作用,这一现象可能与其在帕金森病发病机制中的作用有关。