米诺环素对缺氧猴脉络膜视网膜血管内皮细胞表达血管内皮生长因子受体的影响

作     者：朱丹 白贤明 陶勇 ZHU Dan;BAI Xian-ming

作者机构：内蒙古医科大学附属医院眼科呼和浩特010050 北京大学人民医院眼科暨教育部视觉损伤与修复重点实验室 

出 版 物：《中华眼底病杂志》 (Chinese Journal of Ocular Fundus Diseases)

年 卷 期：2013年第29卷第1期

页      面：62-66页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

主　　题：米诺环素 内皮细胞 病理生理学 血管内皮生长因子受体1 血管内皮生长因子受 体2 细胞低氧 

摘      要：目的观察缺氧状态下猴脉络膜视网膜血管内皮细胞（RF／6A）血管内皮生长因子受体（VEGFR）-1和VEGFR-2的表达情况及米诺环素的干预效果。方法培养RF／6A并将细胞分为正常对照组、缺氧对照组、米诺环素低剂量组（O．5／lmol／L）、米诺环素中剂量组（5．0μmol／L）、米诺环素高剂量组（50．0μmol／L）。实时定量聚合酶链反应（PCR）和免疫组织化学染色检测VEGFR-1、VEGFR-2的mRNA表达和蛋白表达。结果实时定量PCR检测结果显示，各组细胞中VEGFR-1mRNA的表达水平在24（F=0．17）、48（F=1．53）、72h（F=2．04）各时间点未发生显著变化，差异无统计学意义（P〉0．05）。72h后，米诺环素低（t=4．69）、中（t=20．16）、高（t=17．12）剂量组VEGFR-2mRNA表达水平与缺氧对照组比较，差异均有统计学意义（P〈O．001）。免疫组织化学检测结果显示，各组均可见表达VEGFR1、VEGFR-2蛋白的阳性细胞。VEGFR-1蛋白表达水平偏低，染色浅或中度棕色，主要位于内皮细胞胞膜和细胞质中，各组细胞中VEGFR-1蛋白的表达水平在各时间点比较，差异无统计学意义（F24h=0．251，F18h=0．340，F72h=0．589；P〉0．05）；VEGFR-2蛋白表达水平较高，各组内皮细胞胞膜上均可见棕黄色染色物质，细胞质中也见少量表达，缺氧对照组染色强度明显比正常对照组强，并且与米诺环素处理各组间VEGFR-2蛋白表达比较，差异有统计学意义（F24h=19．147，F48h=14．893，F72h=11．984；P〈0．05）。结论缺氧RF／6AVEGFR-2表达上调，米诺环素对其有一定抑制作用。