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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:哈尔滨医科大学病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150086
出 版 物:《哈尔滨医科大学学报》 (Journal of Harbin Medical University)
年 卷 期:2002年第36卷第3期
页 面:180-182页
学科分类:0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术]
基 金:国家自然科学基金资助项目 (3 0 170 3 48 3 9970 2 91)
主 题:Asp896-Val911缺失 C末端表达质粒 阴离子交换蛋白1 酶母双杂交系统 基因克隆 氨基酸定位
摘 要:目的 构建Asp896~Val911缺失的阴离子交换蛋白 1(AnionExchange1,AE1)C末端表达质粒。方法 利用PCR方法 ,以pFAST Bac AE1 C end为模板 ,扩增出AE1后 16位氨基酸Asp896~Val911缺失的C末端基因 ,将其克隆至pGADT7载体上。用醋酸锂法将构建好的pGADT7 AE1 c end truncation转染酵母菌AH10 9,观察其在选择性培养基上的表达情况。结果 成功构建了AE1缺失后 16位氨基酸的C末端表达质粒。结论 重组质粒pGADT7 AE1 c end truncation对酵母无毒性 ,不能激活检测基因 ,可作为酵母双杂交系统中的靶基因。