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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005
出 版 物:《中国医学科学院学报》 (Acta Academiae Medicinae Sinicae)
年 卷 期:2004年第26卷第5期
页 面:533-536页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学]
基 金:国家自然科学基金(30028011 39930050 30340069)资助
摘 要:目的在体外将带有hsp90α基因启动子的报告基因质粒pBLCAT3α1组装为染色质模板,用于研究hsp90α基因的热诱导转录。方法采用竞争性RT-PCR定量检测基因启动子活性的方法,研究染色质模板的体外组装,并比较染色质模板与裸露DNA模板上基因的转录活性。结果优化了热休克处理的HeLa全细胞抽提物在基因转录活性研究中的实验条件:用体外重组表达的染色质组装相关因子与核心组蛋白在体外与hsp90α基因启动子质粒组装成染色质;证明染色质模板的hsp90α基因体外转录水平低于裸露DNA模板,而其热诱导效率显著高于对照组。结论在体外组装的染色质模板具有阻遏hsp90α基因转录的活性,但明显提高了该基因的热诱导表达效率。