脐血巨核祖细胞的体外扩增

作     者：冯义 肖志坚 徐世才 卢士红 刘斌 刘津华 韩忠朝 Feng Yi;XIAO Zhi-jian;Xu Shi-cai;LU Shi-hong;Liu Bin;Liu Jin-hua;HAN Zhong-chao

作者机构：中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 

出 版 物：《中国医学科学院学报》 (Acta Academiae Medicinae Sinicae)

年 卷 期：2005年第27卷第2期

页      面：199-204页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家高技术研究发展计划项目(863项目)(2003A A205060) 天津市科技重大攻关项目(003114311) 

主　　题：脐血 巨核祖细胞 血小板生成素 白细胞介素-11 肝素 

摘      要：目的联合血小板生成素(TPO)、白细胞介素-11(IL-11)和肝素用脐血CD34+细胞定向扩增巨核祖细胞。方法采用免疫磁珠法(M ACS)分选CD34+细胞,用TPO、IL-11和肝素定向扩增巨核祖细胞,巨核祖细胞集落分析(CFU-M K)测定巨核祖细胞扩增倍数,流式细胞术检测巨核祖细胞分化过程中不同细胞组群(CD34+、CD41a+、CD61+、CD34+CD41a+和CD41a+CD61+)的变化,免疫组织化学染色(CD41a)和透射电镜观察巨核细胞形态及超微结构,血小板体外活化实验及非肥胖性糖尿病/严重联合免疫缺陷鼠异种体内移植实验评价扩增的巨核祖细胞功能。结果单用TPO7d时,CD34+CD41a+细胞扩增(4.0±1.7)倍;与IL-11联用后扩增到(10.5±4.8)倍;再加入肝素后扩增达(29.9±6.4)倍,TPO+IL-11+肝素组扩增倍数为TPO组、TPO+IL-11组的7.5、2.85倍,与两组相比差异均有显著性(P50个细胞/集落)达(106.8±26.9)倍,较TPO、TPO+IL-11组均有明显增加(P0.05)。将扩增第7天的巨核细胞静脉输注于经放射预处理的非肥胖性糖尿病/严重联合免疫缺陷鼠,可明显加速其血小板及白细胞的恢复并提高小鼠生存率。电镜显示扩增的巨核细胞有一定的界膜发育等成熟特征,体外血小板活化实验证实,扩增的巨核细胞在体外可产生血小板。