低氧微环境促进聚3羟基丁酸酯-co-4羟基丁酸酯与小鼠骨髓间充质干细胞三维培养形成心肌补片的研究

作     者：穆军升 田琨 周帆 伯平 Mu Junsheng;Tian Kun;Zhou Fan;Bo Ping

作者机构：首都医科大学附属北京安贞医院心脏外科/北京市心肺血管疾病研究所100029 解放军总医院第三医学中心超声科北京100039 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2020年第37卷第10期

页      面：1870-1873页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81870181) 首都医科大学学生科研创新项目(XSKY2019205) 

主　　题：低氧微环境 聚3羟基丁酸酯-co-4羟基丁酸酯 心肌补片 心肌梗死 缺氧诱导因子-1α通路 

摘      要：目的:观察低氧微环境对小鼠骨髓间充质干细胞(mMSCs)与聚3羟基丁酸酯-co-4羟基丁酸酯[P(3HB-co-4HB)]三维培养形成心肌补片的影响。方法:提取mMSCs,将5代mMSCs与P(3HB-co-4HB)三维培养制作成细胞补片,随机分为常氧组和低氧组,用细胞计数试剂盒(CCK-8)法测定细胞增殖;扫描电子显微镜(SEM)观察补片存活、黏附、生长。加入诱导剂5氮杂胞苷,免疫荧光检测两组心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达;通过实时定量聚合酶链反应(PCR)检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA的表达,用蛋白质印迹法(Western blot)检测两组HIF-1α蛋白的表达。采用独立样本均数t检验进行统计学分析。结果:CCK-8法测定低氧组吸光度(A)值(0.349±0.038)显著大于常氧组(0.308±0.025)(t=2.420,P0.05),SEM观察到低氧组P(3HB-co-4HB)材料上细胞数量更多,细胞形态正常,黏附牢固。免疫荧光显示低氧组cTnT表达比常氧组更加显著;实时定量PCR观察到低氧组的HIF-1 mRNA表达水平上调(P0.05);Western blot检测HIF-1α蛋白相对表达水平低氧组(0.63±0.06)显著高于常氧组(0.47±0.05)(P0.05)。结论:低氧微环境可促进mMSCs在P(3HB-co-4HB)上的黏附、存活、增殖、分化,并且形成一种更有效的心肌补片,这一效应可能与HIF-1α通路的激活有关。