突变的SOD1 cDNA与人MAP/MARK1片段在人胚肾293细胞中的相互作用

作     者：陈桂生 史树贵 李露斯 陈康宁 袁顺宗 彭旭 吴军 罗高兴 CHEN Gui-sheng;SHI Shu-gui;LI Lu-si;CHEN Kang-ning;YUAN Shun-zong;PENG Xu;WU Jun;LUO Gao-xing

作者机构：第三军医大学西南医院神经内科重庆400038 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室重庆400038 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2007年第29卷第24期

页      面：2327-2329页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 071007[理学-遗传学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30300116) 

主　　题：突变SOD1 cDNA 人MAP/MARK1 免疫共沉淀 相互作用 

摘      要：目的用酵母双杂交方法显示突变的SOD1cDNA与人MAP/MARK1的片段结合,进一步探讨二者能否在哺乳动物表达系统人胚肾293细胞中发生相互作用,以验证酵母双杂交的结果。方法采用PCR方法及双酶切的方法构建含突变SOD1cDNA片段的真核表达质粒pCMV-Myc和含人MAP/MARK1的片段真核表达质粒pCMV-HA,分别或共同转染人胚肾293细胞,进行免疫共沉淀检测。结果免疫共沉淀结果表明,重组含突变的SOD1cDNA质粒pCMV-Myc分别与空载体pCMV-Myc、pCMV-HA共转染,免疫沉淀物中均未检测到结合蛋白,只有重组含突变SOD1cDNA真核表达质粒pCMV-Myc与重组含人MAP/MARK1的片段真核表达质粒pCMV-HA共转染时,在免疫沉淀物中能检测到结合蛋白,表现在蛋白免疫印迹上有特异性目的条带。结论突变的SOD1cDNA与人MAP/MARK1片段在人胚肾293细胞中存在蛋白水平的相互作用。