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VEGF/bFGF复合多肽抗体的制备及对卵巢癌细胞增殖抑制作用

The function of antibodies prepared from VEGF/bFGF complex peptide immunized mice in inhibiting proliferation of SKOV3 cells

作     者:潘磊 张晋霞 王金胜 翁锐强 邓宁 PAN Lei;ZHANG Jinxia;WANG Jinsheng;WENG Ruiqiang;DENG Ning

作者机构:暨南大学生命科学技术学院抗体工程研究中心广东省分子免疫与抗体工程重点实验室广州510632 

出 版 物:《免疫学杂志》 (Immunological Journal)

年 卷 期:2014年第30卷第6期

页      面:512-515,538页

核心收录:

学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金(81171446) 中央高校基本科研业务费专项资金(21612112) 

主  题:bFGF VEGF 复合多肽 血管新生 增殖抑制 

摘      要:目的研究VEGF/bFGF复合多肽(VBP3)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)血管新生和人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制的影响。方法通过镍离子柱亲和层析和离子交换层析方法纯化出诱导表达的VBP3蛋白,免疫Balb/c小鼠制备抗bFGF和抗VEGF的多克隆抗体,酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测抗体效价和特异性。成管试验研究抗体对HUVEC细胞的成管影响,CCK-8检测抗体对SKOV3增殖抑制的影响。Western blot检测抗体对bFGF和VEGF下游信号通路中Erk1/2和Akt磷酸化的影响。结果 SDS-PAGE鉴定出了纯度较高的VBP3蛋白;ELISA方法检测出了高滴度的抗体;HUVEC的成管实验结果表明VBP3多克隆抗体在一定程度上抑制了HUVEC的成管;CCK-8检测出抗体体外抑制了SKOV3细胞增殖,在抗体质量浓度为100μg/ml时抑制率达到39.20%。Western blot结果表明抗bFGF和抗VEGF多克隆抗体显著抑制FGFR和VEGFR下游信号通路中Erk1/2和Akt的磷酸化。结论 VBP3可能作为一种多肽疫苗抑制肿瘤的生长。

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