副猪嗜血杆菌种特异性基因的筛选与鉴定

作     者：李继昌 崔宁 刘娇 周泷 张艳禾 谢芳 李刚 牛惠 王春来 LI Jichang;CUI Ning;LIU Jiao;ZHOU Long;ZHANG Yanhe;XIE Fang;LI Gang;NIU Hui;WANG Chunlai

作者机构：东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030 黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室哈尔滨150001 

出 版 物：《东北农业大学学报》 (Journal of Northeast Agricultural University)

年 卷 期：2014年第45卷第6期

页      面：79-83页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然基金项目(31201907) 

主　　题：副猪嗜血杆菌 抑制消减杂交 种特异性基因 鉴定 

摘      要：为筛选副猪嗜血杆菌(HPS)种特异性的基因,采用抑制消减杂交(SSH)技术,以HPS DNA为Tester,以猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)DNA为Driver,通过2轮消减杂交和2次PCR扩增,将第2次PCR产物连接pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆后测序,经Southern Blot验证和BLAST分析,获得6个HPS特异基因片段。研究为建立副猪嗜血杆菌基因鉴别诊断方法及ELISA抗原靶标的鉴定奠定基础。