益气活血法对糖尿病鼠心肌组织Hyp和TGF-β1的影响

作     者：汪升薏 

作者单位：中国中医科学院 

学位级别：硕士

导师姓名：倪青

授予年度：2016年

学科分类：100506[医学-中医内科学] 1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：益气活血法 糖尿病心肌病 大鼠 Hyp TGF-β1 

摘      要：本课题来源于国家自然基金课题项目“益气活血方活性组分抑制糖尿病仓鼠心肌病心室重塑及细胞凋亡的机制,(编号：81173258),包括文献研究和实验研究两部分内容。第一部分文献研究结果显示益气活血法是糖尿病心肌病法基本治法,第二部分结合前期实验研究结果,通过实验研究进一步证明益气活血法对糖尿病心肌病的治疗作用及疗效机制。第一部分文献研究通过查阅国内外文献研究发现,气虚血瘀是糖尿病心肌病的主要病机,益气活血法是糖尿病心肌病的主要治法,益气活血法防治糖尿病心肌病临床疗效显著,且有大量循证依据支持。第二部分实验研究目的：制备糖尿病心肌病大鼠模型,将前期实验筛选出的益气活血方基于有效组分的最佳配方与添加被删除有效组分后的组分配方及原复方汤剂进行疗效比较,从分子水平证明益气活血法治疗糖尿病心肌病的科学性。方法：50只雄性SD大鼠,随机选取44只采用高脂高糖饮食诱导胰岛素抵抗,然后给予一次性腹腔注射中等剂量(50mg/kg)链脲佐菌素建立糖尿病心肌病动物模型,随机分为6组,分别为A配方组(A组),B配方组(B组),A配方加人参总皂苷组(A+组),B配方加丹参酮ⅡA、乙酸龙脑酯组(B+组),益气活血方组(Y组)及模型组,每组7-8只,另设正常组6只,监测大鼠一般情况、体重和空腹血糖,灌胃4周后以1%戊巴比妥钠2m1/kg腹腔注射麻醉大鼠取材,计算大鼠心脏重量指数,采用苏木素-伊红染色观察各组大鼠心肌组织形态学,酶联免疫吸附试验法测定心肌羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hyp)含量、半定量反转录—聚合酶链反应测定转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1) mRNA的表达水平。结果：1.糖尿病心肌病动物模型的制备。与正常组比较,模型组大鼠一般情况较差,血糖显著升高、体重显著下降(P0.05)；A组、B组较A+组、B+组体重和血糖情况明显好转(P0.05)；A+组、B+组大鼠心肌组织Hyp含量较A组、B组明显增多,差异有统计学意义(P0.05)；与模型组比较,A组、B组、Y组大鼠心肌组织TGF-β1 mRNA表达水平显著降低(P0.05)；A组、B组、Y组大鼠心肌组织TGF-β1 mRNA表达水平无显著性差异(P0.05)；A组、B组大鼠心肌组织TGF-β1 mRNA表达水平较A+组、B+组显著降低(P0.01)。结论：1.益气活血法能显著改善糖尿病鼠心肌组织病理损害,减少心肌组织Hyp的含量和TGF-β1 mRNA的表达,从而抑制心肌纤维化。2.益气活血方基于有效组分的最佳配方具有与原复方汤剂相近的疗效,增加被删除的有效组分后疗效下降。