分子伴侣介导的自噬在系统性红斑狼疮中的作用

作     者：吴邱红 

作者单位：川北医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：袁国华

授予年度：2019年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：溶酶体相关膜蛋白2 自噬 分子伴侣介导的自噬 系统性红斑狼疮 

摘      要：目的:检测系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediated autophagy,CMA)标志性分子溶酶体相关膜蛋白(lysosome-associated membrane proteins,LAMP)-2表达,旨在探讨CMA与SLE发病的关系。方法:1.选取88例SLE患者(SLE)组和40例健康体检者(对照组),应用实时定量PCR检测两组受试者PBMCs中LAMP-2mRNA表达水平,分析与SLE患者临床特点及病情活动度的相关性。2.通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot,WB)检测两组受试者PBMCs中溶酶体内LAMP-2A蛋白的表达水平。3.应用激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning Confocal Microscopy,LSCM)检测两组受试者PBMCs中LAMP-2A与溶酶体共定位。结果:***-2 mRNA表达水平在正常对照组为1.015±0.667,在SLE组为2.402±2.233(p=0.000)。进一步分析显示LAMP-2 mRNA表达水平与SLEDAI呈明显正相关(r=0.312,P=0.003),而且LAMP-2 mRNA表达增高患者的肾脏损害发生率明显高于非增高患者(40.7%vs 16.3%,p=0.013),其它临床、实验室检查指标,以及激素、羟氯喹和免疫抑制剂使用情况在不同LAMP-2 mRNA表达水平患者间并未发现有统计学意义的差异。***患者中LAMP-2A蛋白质表达水平显著高于正常对照组(0.482±0.207和0.294±0.190,t=2.319,p=0.03)。***患者LAMP-2A(绿色荧光)与溶酶体(红色荧光)较正常对照组荧光强度增加,绿色荧光与红色荧光融合后的黄色荧光较正常对照组明显增加,即SLE患者LAMP-2A与溶酶体共定位较正常对照组增加。结论:***患者LAMP-2 mRNA表达水平、LAMP-2A蛋白质表达水平及LAMP-2A与溶酶体共定位增加,提示SLE患者CMA功能增强,并且LAMP-2 mRNA表达水平增高与肾脏受累有关。2.通过干预调整CMA关键分子LAMP-2A水平,有望为SLE的治疗寻找新的靶点。