不同剂量半夏泻心汤对CAG大鼠PI3K/AKT通路的影响

作     者：门凯龙 

作者单位：山东中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：韩涛

授予年度：2019年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：PI3K/AKT 半夏泻心汤 慢性萎缩性胃炎 免疫组织化学 

摘      要：目的探索半夏泻心汤干预慢性萎缩性胃炎大鼠模型PI3K/AKT通路的效应机制,并比较不同剂量之间的效应差异。方法将SPF级Wistar大鼠随机分为空白对照组和模型组。模型组用于制备慢性萎缩性胃炎大鼠模型,造模成功后随机分为模型对照组、半夏泻心汤高剂量组、半夏泻心汤低剂量组、维酶素组。使用维酶素和不同剂量半夏泻心汤干预慢性萎缩性胃炎大鼠模型,观察大鼠胃黏膜病理改变。应用免疫组织化学第二代聚合酶两步法对大鼠胃黏膜组织染色,检测PTEN、VEGF、PIK3CA、PIK3CB、p-AKT、AKT1/2/3、mTOR、BCL-2、GSK-3β、FOXO3A蛋白表达情况,从而探明半夏泻心汤对PI3K/AKT作用在干预慢性萎缩性胃炎中发挥的效应机制。结果病理切片显示,半夏泻心汤干预组胃黏膜固有层腺体的排列相比模型组较紧密,黏膜下层炎性细胞数量明显较少。免疫组化分析显示,在PI3K/AKT通路方面,半夏泻心汤高剂量组相比模型组PIK3CA的表达减少(P0.05),PIK3CB、AKT1/2/3、p-AKT的表达显著减少(P0.01),同时半夏泻心汤低剂量组相比模型组AKT1/2/3的表达显著减少(P0.01);在肿瘤抑制因子方面,半夏泻心汤高剂量组相比模型组的PTEN、FOXO3A表达量显著增加(P0.01),同时半夏泻心汤低剂量组相比模型组FOXO3A表达量增加(P0.05),PTEN表达量显著增加(P0.01);在细胞生长调节方面,半夏泻心汤高剂量组相比模型组mTOR表达减少(P0.05),BCL-2表达显著减少(P0.01),GSK-3β显著增加(P0.01),同时半夏泻心汤低剂量相比模型组,mTOR表达减少(P0.05)。在调节血管内皮生长因子方面,半夏泻心汤高剂量组相比模型组VEGF表达量减少(P0.05)。结论(1)半夏泻心汤可以减轻慢性萎缩性胃炎模型胃黏膜下层的炎性浸润并有效改善胃黏膜固有腺体的减少和萎缩。(2)半夏泻心汤可以通过抑制PI3K/AKT细胞信号转导通路来抑制胃黏膜上皮层细胞和固有层细胞的增殖并加速其凋亡,从而阻止胃黏膜上皮层细胞和固有层细胞发生突变。(3)高剂量半夏泻心汤抑制PI3K/AKT通路方面和改善病理改变方面的作用皆优于低剂量半夏泻心汤。