铜绿假单胞菌中algUmucABD操纵子突变特征及其对支气管扩张症急性加重的影响

作     者：谭宇雪 

作者单位：遵义医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张湘燕

授予年度：2023年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：支气管扩张症 铜绿假单胞菌 基因突变 algUmucABD/algTmucABD操纵子 急性加重 

摘      要：目的:分析支气管扩张症(简称支扩)住院患者分离的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)中algUmuc ABD操纵子的突变特征,探索支扩频繁加重的独立危险因素。方法:以2019年1月至2022年8月贵州省人民医院合并PA感染的支扩住院患者及其PA分离株为研究对象,收集患者的病历资料和PA菌株。使用Luria-Bertani琼脂和假单胞分离琼脂对PA的黏液样表型(Mucoid phenotypes,MP,为黏液型和非黏液型)及藻酸盐形态类型(Alginate morphotypes,AM,为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型)进行鉴定,采用聚合酶链反应扩增algUmuc ABD操纵子中各基因(algU、muc A、muc B、muc D),DNAMAN软件进行序列比对和氨基酸翻译。总结4种基因的突变情况及其与MP和AM的关系;根据每株PA中algUmuc ABD操纵子的突变情况将其分为4种基因突变类型(Gene mutation types,GMT,为仅发生muc A突变、muc A合并其他基因突变、不含muc A突变的其他基因突变和无基因突变),分析GMT在不同MP和AM中有无差异;根据近1年急性加重次数是否≥2次,将患者分为频繁加重组和非频繁加重组,分析两组中患者的临床特征及菌株因素有无差异,将P0.2的因素纳入二元Logistic回归,计算比值比(Odds ratio,OR)及95%置信区间(Confidence interval,CI),分析支扩频繁加重的独立危险因素;使用SPSS软件进行所有数据分析。结果:本研究共收集到70例患者和75株PA。PA的MP和AM分布为:黏液型64株(AM为Ⅰ型38株,Ⅱ型3株,Ⅳ型23株),非黏液型11株(AM均为Ⅲ型),黏液型占比85.33%。76%的PA(黏液型51株,非黏液型6株)中algUmuc ABD操纵子发生基因突变,其中algU、muc A、muc B和muc D突变的黏液型PA分别占比19.61%、74.51%、31.37%和50.98%。GMT在黏液型和对应AM中的分布为:仅发生muc A突变12株(均为黏液型,AM为Ⅰ型11株,Ⅳ型1株)、muc A合并其他基因突变27株(黏液型26株,AM为Ⅰ型15株,Ⅱ型1株,Ⅳ型10株)、不含muc A突变的其他基因突变18株(黏液型13株,AM为Ⅰ型6株,Ⅳ型7株)和无基因突变18株(黏液型13株,AM为Ⅰ型6株,Ⅱ型2株,Ⅳ型5株);GMT在不同MP(χ=9.012,P=0.017)和AM(χ=23.216,P=0.006)中差异有统计学意义,AM为Ⅰ型的PA中91.7%仅发生muc A突变。algUmuc ABD操纵子中muc ABD最多的突变类型依次为430del G、A631G和A409G,algU无热点突变区域。MP在两组间的差异无统计学意义,而Ⅳ型AM在频繁加重组中更多[18(42.9)vs.5(15.2),P0.05]。二元Logistic回归分析结果示支扩频繁加重的独立危险因素为:胸部HRCT支扩累及肺叶数[OR(95%CI):1.835(1.124-2.997),P=0.015]和PA仅发生muc A突变[OR(95%CI):17.522(1.806-169.991),P=0.014]。结论:1.本研究中黏液型PA检出率高,AM以Ⅰ型和Ⅳ型为主。***中MP为黏液型和AM为Ⅰ型主要与muc A突变有关。***中除MP外,AM也应该被重视。*** A突变是预测支扩频繁加重的独立危险因素。