基于智能恒温扩增技术检测单核增生李斯特氏菌的引物组、试剂盒及方法

专利申请号：CN201810972204.X

公 开 号：CN109402272A

发 明 人：叶蕾 石磊 闫鹤 陈洵 常彦磊 

代 理 人：王会龙

代理机构：44202 广州三环专利商标代理有限公司

专利类型：发明专利

申 请 日：20190301

公 开 日：20180824

专利主分类号：C12Q1/689(20180101)

关 键 词：引物 扩增 单核增生李斯特氏菌 结合蛋白 错配 链置换活性 特异性引物 待检样品 高灵敏度 技术检测 检测试剂 检测引物 现场检测 仪器检测 智能恒温 样品DNA 可检测 试剂盒 显色剂 引物液 引物组 检测 

摘      要：一种基于智能恒温扩增技术检测单核增生李斯特氏菌的引物组、试剂盒和方法。检测引物组包括TP引物、FP引物、BP引物、OP1引物和OP2引物；检测试剂盒包括引物液、反应液、Bst DNA聚合酶、错配结合蛋白、显色剂和对照。其检测方法是通过提取待检DNA，利用具有链置换活性的DNA聚合酶活性，采用四条特异性引物及一种错配结合蛋白，在60～65℃对样品DNA模板进行扩增，可检测到DNA的pg级，其鉴定方式是采用在反应体系中加入Green I并在ESE‑tube scanner仪器检测判断扩增与否，确定待检样品是否含有单核增生李斯特氏菌DNA。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等优点，适于推广应用。