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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
专利申请号:CN201510503913.X
公 开 号:CN105087563B
发 明 人:焦虎平 逄大欣 欧阳红生 孙鑫 谢子聪 王侃侃 郭南南 李家宁 李梦静
代 理 人:北京集佳知识产权代理有限公司赵青朵
代理机构:11227 北京集佳知识产权代理有限公司
专利类型:发明专利
申 请 日:20190115
公 开 日:20150817
专利主分类号:C12N15/11(20060101)
关 键 词:转基因猪 生物技术领域 动物转基因 可视化检测 特异性引物 标记基因 反应条件 恒温条件 基因组 可视化 灵敏度 内引物 浓度比 外引物 检测 样本 标签 筛选 优化
摘 要:本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种动物转基因标签的可视化检测方法。本发明设计、筛选出转基因猪标记基因(Neo)LAMP特异性引物,并优化LAMP反应体系中Mg2+、Betaine、dNTPs、Bst DNA polymerase的浓度以及外引物内引物浓度比,确定了LAMP反应的最适反应条件。建立了可视化LAMP检测方法,可在65℃恒温条件下对不同浓度的转基因猪基因组进行检测,LAMP法检测的灵敏度为2pg/μl,而PCR法仅能检测至2ng/μl。LAMP法检测转基因猪样本准确性达98%。