一种用于治疗β-地中海贫血的慢病毒载体及其制备方法和应用

专利申请号：CN202110379047.3

公 开 号：CN112921054B

发 明 人：程涛 杨智学 张健萍 张凤 殷梦迪 赵梅 许静 张孝兵 

代 理 人：北京品源专利代理有限公司巩克栋

代理机构：北京品源专利代理有限公司

专利类型：发明专利

申 请 日：20230124

公 开 日：20210408

专利主分类号：C12N15/867

关 键 词：慢病毒载体 启动子 编码基因 表达框 珠蛋白 位点 制备方法和应用 顺式调控元件 转录终止信号 地中海贫血 表达水平 沉默突变 串联表达 潜在的 突变型 增强子 滴度 红系 串联 突变 分化 治疗 优化 开发 

摘      要：本发明提供了一种用于治疗β‑地中海贫血的慢病毒载体及其制备方法和应用，所述慢病毒载体包括HBB表达框；所述HBB表达框包括串联的DNase I高敏位点、启动子、HBB编码基因和增强子；所述DNase I高敏位点包括串联表达的HS4、HS3和HS2；所述HBB编码基因包括T87Q突变。本发明通过精简顺式调控元件的长度、使用突变型HBG启动子、优化启动子长度、对潜在的转录终止信号进行沉默突变等多种手段，开发出了新型慢病毒载体，所述慢病毒载体能够实现β‑珠蛋白过表达，其中HBB表达模块总长度约5kb，与BB305载体相比，载体滴度提高了2～4倍，红系分化后β‑珠蛋白表达水平提高了2倍左右。