版权所有:内蒙古大学图书馆 技术提供:维普资讯• 智图
内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
专利申请号:CN202310156733.3
公 开 号:CN116814591A
发 明 人:徐瀚麟 黄宗克 余兆硕 孟祥宇 金旋鹭 何方舟 罗思浩 柯李晶 饶平凡
代 理 人:浙江千克知识产权代理有限公司黎双华
代理机构:浙江千克知识产权代理有限公司
专利类型:发明专利
申 请 日:20230929
公 开 日:20230223
专利主分类号:C12N9/26
关 键 词:麦芽淀粉酶 定向进化 筛选 构建 优选 进化 随机突变文库 氨基酸序列 高通量筛选 耐酸碱能力 易错聚合酶 随机突变 突变文库 油稳定性 高活性 关键点 酶工程 酶活力 耐热 高油 文库 突变 基因 应用 表现
摘 要:本发明涉及酶工程领域,尤其涉及一种耐油麦芽淀粉酶及其定向进化方法和应用,所述耐油麦芽淀粉酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述定向进化方法包括以下步骤:(1)通过向PCR反应系统中加Mn2+对基因进行随机突变,构建突变文库;(2)通过三轮高通量筛选,从优选体文库中获得显性优选体,即得所述耐油麦芽淀粉酶。本发明发明者通过易错聚合酶链反应构建了该酶的随机突变文库,以鉴定具有更高活性和耐油稳定性的优选体,然后筛选关键点突变。这一定向进化技术来对麦芽淀粉酶进行筛选,经过进化后筛选出来的麦芽淀粉酶在高油含量下,依然表现出出色的酶活力,同时具有非常不错的耐热与耐酸碱能力。