一种重组肉毒杆菌神经毒素及其制备方法和应用

专利申请号：CN202311513842.2

公 开 号：CN117586361A

发 明 人：王师亮 王江田 张彦军 刘应康 柴路 

代 理 人：黎琦

代理机构：广州名扬高玥专利代理事务所(普通合伙)

专利类型：发明专利

申 请 日：20240223

公 开 日：20231114

专利主分类号：C07K14/33

关 键 词：肉毒杆菌神经毒素 大肠杆菌 蛋白酶 双链 外源 生物工程技术领域 制备方法和应用 氨基酸序列 编码基因 单链多肽 单链形式 核酸序列 活性形式 切割单链 切割效率 生物活性 双链形式 一步生产 识别位 等比 制备 切割 

摘      要：一种重组肉毒杆菌神经毒素及其制备方法和应用，属于生物工程技术领域，重组肉毒杆菌神经毒素的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示，该重组肉毒杆菌神经毒素的编码基因的核酸序列如SEQ ID NO:1‑5所示。本发明的重组肉毒杆菌神经毒素，其插入外源蛋白酶识别位点，有效提高对单链多肽的切割效率，得到具有较高生物活性的双链形式BoNT/A。本发明的双链式肉毒杆菌神经毒素的制备方法，通过高效切割所述的重组肉毒杆菌神经毒素制得双链式肉毒杆菌神经毒素。进一步地，在大肠杆菌中定量等比表达单链形式重组肉毒杆菌神经毒素和外源蛋白酶，外源蛋白酶可在大肠杆菌中切割单链形式重组肉毒杆菌神经毒素产生活性形式的双链式肉毒杆菌神经毒素，从而实现利用大肠杆菌进行一步生产。