人工抗菌肽MA-D4的制备方法及其应用

专利申请号：CN201310427278.2

公 开 号：CN103467580B

发 明 人：刘诚 

专利类型：授权发明

申 请 日：20150708

公 开 日：20130918

专利主分类号：C07K14/00(20060101)

关 键 词：人工抗菌肽 抗菌肽 大肠杆菌BL21 发明制备方法 亲和层析纯化 大肠杆菌 氨基酸序列 规模化生产 核苷酸序列 表达载体 分离纯化 广谱抗菌 合成目的 基因拼接 疾病治疗 人工设计 设计编码 食品防腐 新型抗菌 诱导表达 制备方法 肠激酶 革兰氏 偏好性 阳性菌 重叠区 阴性 扩增 酶切 溶血 原核 生产成本 离子 基因 转化 潜力 开发 

摘      要：本发明涉及人工抗菌肽MA-D4的制备方法及其应用。本发明人工设计出人工抗菌肽MA-D4的氨基酸序列，并采用大肠杆菌偏好性密码子设计编码该抗菌肽的核苷酸序列；采用重叠区扩增基因拼接法合成目的基因，构建原核表达载体，并转化至大肠杆菌BL21或Rosetta中诱导表达；表达产物经肠激酶酶切处理和镍离子亲和层析纯化后，即可获得本发明人工抗菌肽MA-D4。该抗菌肽具备较强的广谱抗菌活性，可抑制革兰氏阳性菌和阴性菌，同时不具有溶血活性。因此，其可作为一类新型抗菌药物，在食品防腐、疾病治疗等方面具有良好的应用前景，极具开发潜力。本发明制备方法表达效率高，分离纯化简单，生产成本低，稳定性好，可应用于规模化生产。