猪链球菌种水平荧光定量PCR检测方法

专利申请号：CN201310020452.1

公 开 号：CN103122383A

发 明 人：白雪梅 郑翰 纪少博 刘凯 

代 理 人：王朋飞;张庆敏

代理机构：11002 北京路浩知识产权代理有限公司

专利类型：发明专利

申 请 日：20130529

公 开 日：20130121

专利主分类号：C12Q1/68(20060101)

关 键 词：链球菌 检测 模拟标本 血液 荧光定量PCR 常见致病菌 特异性引物 条件致病菌 基因序列 快速检测 目的基因 细菌含量 阳性结果 分离株 血清1 阴性 拷贝 探针 种猪 灵敏 

摘      要：本发明提供了一种猪链球菌种水平的荧光定量PCR检测方法，其是针对askA基因序列设计出特异性引物和TaqMan-MGB探针，建立了快速检测猪链球菌的Real-time PCR方法。该方法具有较高的灵敏性和良好的特异性，所检测的血清1/2、1、2、3、5、7、9、14型猪链球菌以及120株分离株均显示阳性结果，所检测的27种常见致病菌和条件致病菌都为阴性。本方法可以检测到100拷贝/反应体系的目的基因。同时进行了血液模拟标本的检测，血液模拟标本中3.5×102CFU/ml的细菌含量可被检出。