一种基于吸光度的高准确度核酸浓度测定方法

专利申请号：CN201710546327.2

公 开 号：CN107328724A

发 明 人：武利庆 高运华 郑康乐 罗一 杨彬 金有训 米薇 盛灵慧 王志栋 

代 理 人：卢新

代理机构：11241 北京双收知识产权代理有限公司

专利类型：发明专利

申 请 日：20171107

公 开 日：20170706

专利主分类号：G01N21/31(20060101)

关 键 词：核酸标准物质 配制 空白缓冲溶液 核酸样品 括号法 吸光度 合成标准不确定度 标准不确定度 非线性规划 准确度 标准物质 不确定度 待测样品 核酸测定 浓度水平 梯度稀释 准确结果 标准品 求解 稀释 

摘      要：本发明公开了一种基于吸光度的高准确度核酸测定方法，包括如下步骤：(1)准备核酸标准物质和核酸样品以及对应的空白缓冲溶液。(2)用空白缓冲溶液将核酸标准物质进行梯度稀释，分别测定稀释后的各个浓度水平标准物质以及待测样品的吸光度。计算出样品的初测浓度c0。(3)根据初测浓度用核酸标准物质配制K1c0和K2c0的一对标准采用括号法对核酸样品浓度进一步测定。根据配制过程，计算出这一对标准品各自的标准不确定度u1和u2，并进一步计算出测定结果的合成标准不确定度uc。(4)通过求解非线性规划使不确定度最小从而得到K1和K2的具体值。(5)根据计算出的K1和K2的值，配制出高标和低标，并采用括号法对样品进行测定，得到样品的准确结果c。