一株耐冷冻面包酵母菌株及其基因无痕敲除方法

专利申请号：CN201310127538.4

公 开 号：CN103232947A

发 明 人：肖冬光 王光路 董建 张翠英 

代 理 人：王伟锋

代理机构：北京鼎佳达知识产权代理事务所(普通合伙)

专利类型：发明申请

申 请 日：20130807

公 开 日：20130412

专利主分类号：C12N1/18(20060101)

关 键 词：冷冻面包 菌株 无痕 基因 亲本 酵母 酵母菌 酵母整合质粒 中性海藻糖酶 发酵性能 发明构建 酵母菌株 面包酵母 内海藻糖 外源基因 存活率 面团 基因组 冷冻 细胞 融合 

摘      要：本发明公布了一株耐冷冻面包酵母菌株及其构建方法，具体是通过无痕敲除基因NTH1构建的耐冷冻面包酵母BY-14AΔU，保藏编号CGMCC No.7379。无痕基因敲除方法构建耐冷冻面包酵母，是通过融合PCR和酵母整合质粒YIplac211，敲除编码中性海藻糖酶基因NTH1来实现的。本发明实现了将面包酵母NTH1基因快速、高效地无痕敲除，菌株BY-14AΔU在其他发酵性能不受影响的情况下，胞内海藻糖含量较亲本菌株提高了134％；细胞在液体面团中冷冻21天后，存活率达到78％，是亲本菌株的2.6倍。本发明构建的酵母菌中基因组上不残留任何外源基因，因此可以安全的用于工业生产。