生产葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶的方法

专利申请号：CN201210141944.1

公 开 号：CN102719459B

发 明 人：张爱联 张泽华 张添元 易国辉 

专利类型：授权发明

申 请 日：20160309

公 开 日：20120502

专利主分类号：C12N15/56(20060101)

关 键 词：葡聚糖外切酶 葡萄糖苷酶 葡聚糖内切酶 枯草芽孢杆菌 表达载体 工程菌 毕赤酵母表达载体 葡聚糖内切酶基因 毕赤酵母工程菌 毕赤酵母重组子 酶基因表达 天然菌株 重组混合 高表达 克隆木 酶产量 酶产品 宿主菌 重组子 基因 构建 生产 发酵 生物技术 混合 筛选 遗留 转化 公开 解决 

摘      要：本发明公开了生产葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶的方法。属生物技术领域。首先克隆木霉的葡聚糖内切酶基因、葡聚糖外切酶基因和β-葡萄糖苷酶基因；构建含这三种酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌表达载体和毕赤酵母表达载体；将表达载体转化相应的宿主菌；分别筛选高表达葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶的枯草芽孢杆菌重组子和毕赤酵母重组子作为工程菌。发酵枯草芽孢杆菌工程菌和毕赤酵母工程菌生产的重组混合葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶。本发明解决了用天然菌株生产混合葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶中遗留的酶产量低的关键问题，有利于降低其酶产品的价格。