CRISPR-Cas9靶向敲除人细胞SANIL1基因及其特异性的sgRNA

专利申请号：CN201810259431.8

公 开 号：CN108410877A

发 明 人：杨蕊菊 陆路 杨兴林 潘讴东 

专利类型：发明申请

申 请 日：20180817

公 开 日：20180327

专利主分类号：C12N15/113(20100101)

关 键 词：人细胞 敲除 基因 构建 病毒载体系统 蛋白表达水平 基因外显子 特异性靶向 病毒感染 碱基序列 切割效率 作用机制 靶向性 慢病毒 细胞株 靶向 蛋白 研究 

摘      要：本发明公开了CRISPR/Cas9靶向敲除人细胞SANIL1基因及其特异性sgRNA。首先是获得特异性靶向SANIL1基因外显子的sgRNA，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；其次是构建SANIL1基因的sgRNA到病毒载体系统，该系统含有Cas9蛋白；最后将含有该sgRNA的CRISPR/Cas9病毒感染人细胞，获得SANIL1蛋白表达水平显著降低的细胞株。本发明具有操作步骤简单、sgRNA靶向性好、且对SANIL1基因切割效率高；此外，所构建的CRISPR/Cas9慢病毒系统具有敲除效率高的优势，并能特异性敲除SANIL1基因，得到敲除SANIL1基因的人细胞，从而为进一步研究人细胞中SANIL1的作用机制提供强有力的工具。