一种基于衍生化的多肽在血浆样品中的前处理方法

专利申请号：CN201710033319.8

公 开 号：CN107045064A

发 明 人：狄斌 杨漾 秦星宇 陈梦伊 

专利类型：发明专利

申 请 日：20170815

公 开 日：20170113

专利主分类号：G01N33/68(20060101)

关 键 词：多肽 衍生化 苯基 巯基 马来酰亚胺衍生物 苯基马来酰亚胺 马来酰亚胺基 蛋白沉淀剂 检测灵敏度 马来酰亚胺 衍生化试剂 样品前处理 定量分析 低温冷冻 定量检测 二甲氨基 血浆蛋白 血浆样品 离心机 传统的 碘化铵 方法学 灵敏度 前处理 三甲基 进样 乙腈 质谱 回收率 沉淀 定性 验证 优化 应用 分析 多肽 血浆样品 前处理 衍生化 巯基 

摘      要：本发明公开了一种基于多肽衍生化方法对血浆样品进行前处理的方法。该方法是将衍生化试剂马来酰亚胺衍生物：N‑苯基马来酰亚胺，1‑[4‑(二甲氨基)苯基]马来酰亚胺及4‑(N‑马来酰亚胺基)苯基三甲基碘化铵分别直接溶于蛋白沉淀剂乙腈中，在优化好的条件下对含有巯基的多肽同时进行衍生化及血浆蛋白沉淀。样品利用低温冷冻离心机对样品进行离心，取上清进样。建立质谱方法并进行方法学验证，对样品进行定量分析。该方法与传统的衍生化法相比大大简化了样品前处理步骤，同时提高了多肽回收率及分析灵敏度。该方法具有操作简单，检测灵敏度高，成本低等优点，对含有巯基的多肽定性定量检测具有广泛的应用前景。