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二氧化碳对灵芝子实体三萜酸生物合成途径关键酶基因调控的影响

二氧化碳对灵芝子实体三萜酸生物合成途径关键酶基因调控的影响

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世界中医药学会联合会中药新药创制专业委员会成立大会暨第一届学术年会

作者：魏巍韩嘉钰贺黎铭余梦瑶许晓燕江南李芳罗霞四川省中医药科学院四川大学生命科学学院成都610041

目的：研究CO2浓度对袋料栽培灵芝子实体生长过程中三萜及甾醇含量变化以及三萜酸生物合成途径关键酶基因调控的影响。方法：分别设定正常浓度(500ppm)、中浓度(1000ppm)和高浓度(1500ppm)的CO2条件作为灵芝的出芝条件，测定不同生长时... 详细信息

目的：研究CO2浓度对袋料栽培灵芝子实体生长过程中三萜及甾醇含量变化以及三萜酸生物合成途径关键酶基因调控的影响。方法：分别设定正常浓度(500ppm)、中浓度(1000ppm)和高浓度(1500ppm)的CO2条件作为灵芝的出芝条件，测定不同生长时期的灵芝子实体以及成熟子实体的不同部子实体的三萜及甾醇含量，采用荧光定量PCR检测三萜酸生物合成途径中的3-羟基-3-甲基戊二酰-乙酰辅酶A还原酶(HMGR)、羊毛甾醇合酶(LS)及鲨烯合酶(SQS)三种基因表达量，研究其变化规律。结果：提高CO2浓度能使灵芝子实体中三萜及甾醇含量提高;但是二氧化碳浓度仅影响三萜及甾醇含量的多少，不影三萜及甾醇含量的整体分布和变化规律。提高二氧化碳浓度均会导致三萜酸生物合成途径关键酶基因表达上调;但是不改变灵芝子实体生长过程中三种基因表达的规律。结论：在袋料栽培灵芝过程中，提高空气二氧化碳浓度能提高灵芝主要药效成分三萜及甾醇含量，同时提高三萜酸生物合成途径关键酶基因的表达量，但是对其变化规律无显著影响。

关键词：灵芝袋料栽培 3-羟基-3-甲基戊二酰-乙酰辅酶A还原酶鲨烯合酶羊毛甾醇合酶

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濒危手参离体扩繁体系建立及优化

濒危手参离体扩繁体系建立及优化

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世界中医药学会联合会中药新药创制专业委员会成立大会暨第一届学术年会

作者：胡平夏燕莉周先建杨玉霞方清茂四川省中医药科学院成都610000

目的：实现手参种苗的快速扩增繁殖,以保护兰科濒危野生药用植物资源.方法：在查阅相关文献基础上,以野生手参未成熟蒴果为外植体,利用正交试验设计L9 (3)4方法,着重研究手参种子扩繁关键技术环节,拟筛选出最优技术参数组合,最终建立高... 详细信息

目的：实现手参种苗的快速扩增繁殖,以保护兰科濒危野生药用植物资源.方法：在查阅相关文献基础上,以野生手参未成熟蒴果为外植体,利用正交试验设计L9 (3)4方法,着重研究手参种子扩繁关键技术环节,拟筛选出最优技术参数组合,最终建立高效的手参离体扩繁体系.结果：手参种子萌发最佳培养基为：1/2MS+6-BA 1.0mg·L-1+NAA0.1 mg·L1+AC0.5 g·L-1,种子萌发率为25.2％;原球茎增殖最适培养基为MS+KT1.0mg·L1+NAA0.1 mg·L1+AC0.5 g·L1;原球茎最适分化培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1+KT1.0mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+AC0.5 g·L-1;不定芽增殖最佳培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1+KT1.0mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+ AC0.5 g·L-1+椰子乳10 g·L-1;芽增殖率可达55.3％：最适生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg·L-11+AC0.5 g·L-1+椰子乳10g·L-1,56d后生根率最高可达31.3％、生根数3根;试管苗移栽的最佳方式是苔藓+碎树皮+腐殖土(2：2：1)为混合基质进行多株移栽,但移栽4个月后小苗逐渐发黄、随之根褐化,继而死亡.结论：手参种子无菌苗得到扩繁,试验获得大量组培种苗,但移栽后组培种苗存活率极低,严重阻碍了手参种苗工厂化的后续发展.因此,针对手参组培苗存活技术的研究十分迫切.

关键词：司手参离体扩繁优化

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基于中药"显效理论"的超低毒性多重药物设计思路

基于中药"显效理论"的超低毒性多重药物设计思路

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世界中医药学会联合会中药新药创制专业委员会成立大会暨第一届学术年会

作者：蔡少青北京大学药学院生药学研究室北京100191

本文归纳出中药"显效理论"，即中药通过"众多显效形式(显效型)的单靶点叠加作用、多靶点协同作用(Fig.1)及毒性分散效应(Fig.2)"发挥药效并削弱自身毒性.一味中药可含有约1000种成分，一种成分口服进入体内后又可... 详细信息

本文归纳出中药"显效理论"，即中药通过"众多显效形式(显效型)的单靶点叠加作用、多靶点协同作用(Fig.1)及毒性分散效应(Fig.2)"发挥药效并削弱自身毒性.一味中药可含有约1000种成分，一种成分口服进入体内后又可产生约100种代谢产物.无数化学成分及其无数体内代谢产物中会有众多显效形式，它们可共同发挥"集团军式作用".在药物分子少、靶点分子多的情况下，中药不同种的显效型分子可相继与靶点分子结合，发生叠加作用，当"靶点充分占位"时药效始启动.既有浓度上的叠加作用(Fig.3)又有时间段先后的叠加作用，这使得药效得以持久.显效型呈现药效叠加和毒性分散，源于不同显效形式分子结构之间药效基团相同而毒性基团不完全相同."毒性分散效应"适于对无毒中药的解释而不适于对有毒中药的解释.显效理论揭示中药可以众多化学成分及众多代谢产物参与发挥药效过程，包括叠加作用、协同作用及毒性分散效应，这可有助于阐释和弘扬中药特色优势.那么体现中药的特色优势的中药"显效理论"如何在新药研发中应用？利用"单靶点叠加作用"理论，我们设想研发一个具有相同药效靶点的10种以上化合物组成的新型组合药物.由于每一种化合物用量降低到1/10以下，其毒性应该也会大幅度降低，甚至降低到1/10或更低;同时利用"多靶点协同作用"理论，再选择可作用于相同疾病的不同靶点的另外3～5组(每组10种化合物以上)化合物，组成化合物大复方药物.这样的大组合药物应该具有多靶点的高效性和毒性显著降低的优越性，体现"药效叠加与协同作用以及毒性分散效应"，故称其为"超低毒性多重药物".我们相信这种新药设计策略将有助于大大降低新药研发在临床毒性研究阶段的淘汰率.

关键词：中药显效理论显效形式显效型多成分单靶点叠加作用多成分多靶点协同作用毒性分散效应集团军式作用靶点分子靶点充分占位中药药效物质作用机制代谢产物

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灵芝精氨酸甲基转移酶基因鉴定及表达分析

灵芝精氨酸甲基转移酶基因鉴定及表达分析

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世界中医药学会联合会道地药材多维评价专业委员会成立大会暨第一届学术年会

作者：查良平刘爽袁媛黄璐琦成都中医药大学药学院四川成都611137 道地药材国家重点实验室培育基地中国中医科学院中药资源中心北京100700 道地药材国家重点实验室培育基地中国中医科学院中药资源中心北京100700 北京中医药大学中药学院北京100102 道地药材国家重点实验室培育基地中国中医科学院中药资源中心北京100700

目的：本研究在灵芝转录组基础上,对灵芝精氨酸甲基转移酶GLPRMT1、GLPRMT2和GLPRMT3基因进行全面的生物信息学分析. 方法：利用生物信息学方法对灵芝GLPRMT1、GLPRMT2和GLPRMT3基因编码氨基酸序列的理化特性、亲/疏水性、功能域、... 详细信息

目的：本研究在灵芝转录组基础上,对灵芝精氨酸甲基转移酶GLPRMT1、GLPRMT2和GLPRMT3基因进行全面的生物信息学分析. 方法：利用生物信息学方法对灵芝GLPRMT1、GLPRMT2和GLPRMT3基因编码氨基酸序列的理化特性、亲/疏水性、功能域、二级结构、三级结构和系统发育进化等进行分析和预测;利用转录组FPKM值分析灵芝不同生长时期GLPRMT1、GLPRMT2和GLPRMT3基因的相对表达量. 结果：生物信息学分析表明GLPRMT1和GLPRMT2均具有完整的ORF区且为全长,而GLPRMT3不为全长cDNA;蛋白结构域分析显GLPRMT1、GLPRMT2和GLPRMT3都具有组蛋白精氨酸甲基转移酶最保守的AdoMet-MTases结构域;利用同源建模法对灵芝的PRMT进行分析,预测了其整体空间结构;系统进化树聚类分析显示GLPRMT1、GLPRMT2、GLPRMT3分别与真菌的PRMT3家族、PRMT1家族和PRMT5家族聚为一支;基因表达水平显示GLPRMT2的表达量明显高于GLPRMT1、GLPRMT3,且3个精氨酸甲基转移酶基因表达随着灵芝个体的发育均呈上升趋势. 结论：本研究结果为揭示灵芝表观调控机理奠定了理论基础.

关键词：灵芝精氨酸甲基化转移酶组蛋白甲基化生物信息学基因鉴定

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华蟾素注射液中色胺类成分质谱裂解规律研究

华蟾素注射液中色胺类成分质谱裂解规律研究

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世界中医药学会联合会中药新药创制专业委员会成立大会暨第一届学术年会

作者：辛少鲲边宝林赵海誉中国中医科学院中药研究所首都医科大学中医药学院中国中医科学院中药研究所

目的：华蟾素注射液是一种目前在我国临床广泛使用的中药抗肿瘤注射液,其中色胺类成分为其主要活性成分之一.本研究通过研究华蟾素注射液中色胺类成分的质谱裂解规律,以期为华蟾素注射液中色胺类生物碱的结构鉴定提供可靠的依据.方法：5... 详细信息

目的：华蟾素注射液是一种目前在我国临床广泛使用的中药抗肿瘤注射液,其中色胺类成分为其主要活性成分之一.本研究通过研究华蟾素注射液中色胺类成分的质谱裂解规律,以期为华蟾素注射液中色胺类生物碱的结构鉴定提供可靠的依据.方法：5-羟色胺,N-甲基-5-羟色胺,去氢蟾蜍色胺均为本课题组分离制备所得,采用直接进样方式,以双压线性离子阱串联高分辨质谱Orbitrap Velos Pro检测,选中母离子对其进行碰撞诱导解离,得到一系列碎片离子.以Thermo Xcalibur 2.2 SPl.48处理软件分析,推导其可能的裂解途径.结果：在正离子模式下5-羟色胺的准分子离子峰为177.1020,碎片离子有：160.0755(C10H10ON┐+),132.0806 (C9H10N┐+),117.5701 (C8H7N┐+),115.0440 (C8H5N┐+)等;N-甲基-5-羟色胺的准分子离子峰为191.0812,碎片离子有：160.0755 (C10Ht10ON┐+),148.0756 (C9H10ON┐+),142.0649 (C10H8N┐+),132.0806(C9H10N┐+),115.0540 (C8H5N┐+)等;去氢蟾蜍色胺的准分子离子峰为203.1178,碎片离子有188.0949(C11H12ON2┐+),160.0761(C10H10ON┐+),115.0542 (C8H5N┐+)等.通过分析5-羟色胺,N-甲基-5-羟色胺,去氢蟾蜍色胺的多级质谱碎片,可知在ESI电离源下华蟾素注射液中色胺类成分主要发生—NH3,-CO和-OH等自由基的丢失, 吲哚环则相对稳定不易被破坏.由于此三种化合物均有160.0755的5-羟基吲哚环碎片和115.0542吲哚环碎片,故此二者可以作为华蟾素注射液中色胺类成分的特征碎片以鉴定华蟾素注射液中的其他色胺类成分.结论：本研究探讨了5-羟色胺,N-甲基-5-羟色胺和去氢蟾蜍色胺的质谱裂解规律,为华蟾素注射液中色胺类成分的质谱鉴定研究提供了依据.

关键词：华蟾素注射液高分辨质谱裂解规律 5-羟色胺

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正清风痛宁治疗类风湿关节炎随机对照试验的系统评价

正清风痛宁治疗类风湿关节炎随机对照试验的系统评价

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世界中医药学会联合会中医诊断学专业委员会成立大会暨第一届学术年会

作者：王宝新李鑫谷捷刘良蔡雄范伏元王建国湖南中医药大学中医诊断研究所湖南长沙410007 中医诊断学湖南省重点实验室湖南长沙410007 澳门科技大学中药质量国家重点实验室澳门湖南中医药大学附属第一医院湖南长沙410007

目的评价正清风痛宁治疗类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)的疗效及安全性.方法从中国期刊全文数据库、维普中文科技期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、万方医药期刊数据库、PubMed数据库,全面检索正清风痛宁治疗RA的临... 详细信息

目的评价正清风痛宁治疗类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)的疗效及安全性.方法从中国期刊全文数据库、维普中文科技期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、万方医药期刊数据库、PubMed数据库,全面检索正清风痛宁治疗RA的临床随机对照试验文献,符合纳入标准的文献按Juni量表进行质量评价,采用Cochrane协作网提供的Review Manger 5.2软件进行统计分析.结果最终共纳入6个随机对照试验,共476例研究对象.结果显示：①采用正清风痛宁治疗类风湿关节炎治疗12周的疗效并未优于对照组,差异无统计学意义[RR=1.72,95％CI(0.93,3.18),P＞0.05];②临床指标改善方面：晨僵[MD-12.38,95％ CI(-27.70,2.95),P＞0.05],血沉[MD-4.89,95％CI (-8.73,-1.04),P＜0.05],类风湿因子[MD 0.60,95％ CI (-7.34,8.54),P＞0.05],C反应蛋白[MD-0.40,95％ CI(-1.48,0.68),P＞0.05]. ③安全性方面：正清风痛宁组的不良反应发生明显低于对照组,差异具有显著性[RR=0.37,95％CI(0.24,0.58),P＜0.01].结论基于目前研究,正清风痛宁治疗RA尚未完全明确,但其能显著地降低其他药物不良反应,安全性较高.由于本系统评价纳入的为观察性临床研究,将来有必要开展多中心、大样本、双盲、双模拟的随机对照试验来全面评价正清风痛宁治疗RA的临床疗效,为其治疗RA提供科学的实证依据.

关键词：正清风痛宁类风湿关节炎随机对照试验系统评价

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基于中药材DNA条形码系统的泽泻种子鉴别研究

基于中药材DNA条形码系统的泽泻种子鉴别研究

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世界中医药学会联合会中药新药创制专业委员会成立大会暨第一届学术年会

作者：张娜娜辛天怡金钺谷巍宋经元中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 南京中医药大学南京210046

目的：常用中药泽泻主要含有四环三萜类化合物、挥油、生物碱等多种成分具有抑制动脉粥样硬化、降血脂、利尿、降血压、抗脂肪肝的作用.不同产地不同种质的泽泻药材其微量元素、氨基酸及泽泻醇等成分含量存在差异.泽泻(Alisma plantago-... 详细信息

目的：常用中药泽泻主要含有四环三萜类化合物、挥油、生物碱等多种成分具有抑制动脉粥样硬化、降血脂、利尿、降血压、抗脂肪肝的作用.不同产地不同种质的泽泻药材其微量元素、氨基酸及泽泻醇等成分含量存在差异.泽泻(Alisma plantago-aquatica)和东方泽泻(Alisma orientale)两者的成熟种子外观差别很小,传统的性状鉴别难以区分,在药材生产加工和临床应用中极易出现品种混杂现象,影响泽泻的药材品质和临床疗效.为鉴定不同产地泽泻的基原物种,本研究通过DNA条形码技术,以ITS2序列对来自不同产区的56份泽泻种子样品进行鉴定研究.方法：利用体式显微镜(SZX9)观察种子的形态特征.采用植物基因组DNA提取试剂盒提取总***扩增并进行双向测序.利用CodonCode Aligner 6.0.2对测序结果进行校对拼接,去除低质量区.利用隐马尔可夫模型HMMer对拼接好的序列进行5.8S和28S区域剪切,得到ITS2序列.将所得样品ITS2序列在中药材DNA条形码鉴定系统(http：//***/china/)中进行物种鉴定.利用软件MEGA5.1分析样本序列,根据K2P模型计算遗传距离.结果：来自全国不同产地泽泻全部种子样品共分为两个物种,四川产20份样本为泽泻(***-aquatica),其他36份样本均为《中国药典》(2015年版)规定的基原物种东方泽泻(***).形态观察显示,两者形态差异较小：单粒种子两侧扁,先端钝圆,表面灰黄色,长约为2 mm,宽约1 mm,背部有1-2浅沟.泽泻(*** aquatica)和东方泽泻(***)种子样本ITS2序列长度均为311 bp,GC含量均为56.9％.两个物种序列在第165个碱基处存在A-T变异,四川产区的泽泻(***-aquatica)样本序列表现T,其他产区东方泽泻(***)测定结果为A.两者种内平均K2P均为0,种间遗传距离为0.0032.结论：中药材DNA条形码鉴定系统可为选择正确基原的泽泻种子提供指导,该系统在泽泻人工栽培生产中具有重要应用价值,可为其他中药材种子种苗鉴定提供示范.

关键词： DNA条形码泽泻东方泽泻种子鉴定 ITS2

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基于Microtox技术的中药注射剂微毒快速测试体系反应条件的优化与方法学的考察

基于Microtox技术的中药注射剂微毒快速测试体系反应条件的优化与...

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世界中医药学会联合会中药新药创制专业委员会成立大会暨第一届学术年会

作者：熊静悦李孝容鄢良春赵军宁成都中医药大学四川成都610072 四川省中医药科学院·国家中医药管理局中药质量生物评价重点研究室四川成都610041 四川省中医药科学院·国家中医药管理局中药质量生物评价重点研究室四川成都610041

基于费氏弧菌CS234的Microtox微毒测试体系优化与方法学考察,为该方法更加可靠地应用于中药注射剂综合急性毒性的测试打下基础.采用Plackett-Burman法优化设计影响费氏弧菌发光的因素,建立以七水硫酸锌为标准毒物和质控样品的反应体系,... 详细信息

基于费氏弧菌CS234的Microtox微毒测试体系优化与方法学考察,为该方法更加可靠地应用于中药注射剂综合急性毒性的测试打下基础.采用Plackett-Burman法优化设计影响费氏弧菌发光的因素,建立以七水硫酸锌为标准毒物和质控样品的反应体系,得到最优发光条件为：费氏弧菌冻干粉平衡15min后加入复苏液1ml,混匀10min,取100μ 1菌液测试初始发光度,随后立即加入1ml复苏液或待测样品,反应l0min后再次测试相应发光强度,上述操作均在15℃±1℃条件下完成;复苏稀释液、渗透压调节液及七水硫酸锌储备液不干扰费氏弧菌发光强度的测定,本方法特异性良好;质控样品、定量下限样品批内精密度＜5％、批间精密度＜10％,准确度在87.81％-101.43％范围内.七水硫酸锌溶液在3.86 mg · L-1-77.27 mg·L-1(终浓度)范围内标准曲线方程为y=21.78Ln (x)-15.14,R2=0.998,本方法下ZnSO4·7H2O对费氏弧菌的IC50为19.90mg·L-1;对七水硫酸锌储备液及其质控样品分别连续考察120 h和8h,其RSD％均＜2％,提示其在室温及4℃保存条件下稳定性良好;pH 4.5-pH 8.0时,费氏弧菌发光的波动控制在±10％范围内,该pH可满足绝大多数中药注射剂的测试需要.本实验室针对费氏弧菌CS234建立的微毒测试体系进行优化后,具有良好的特异性、稳定性、灵敏度、准确度及适应性,提示可应用于中药注射剂综合急性毒性的测试.

关键词：中药注射剂微毒测试急性毒性费氏弧菌CS234

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羌活产业发展对策

羌活产业发展对策

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世界中医药学会联合会中药新药创制专业委员会成立大会暨第一届学术年会

作者：蒋舜媛孙辉周毅秦纪洪四川省中医药科学院成都610041 四川大学环境系成都610065 成都大学环境系成都610106

羌活(Notopterygii Rhizoma et Radix)是我国传统中医药体系中的常用重要药材，也是藏、羌、维、蒙等民族医药体系的重要药材，始载于《神农本草经》，列为上品，作为异名置独活项下，因产羌地而得名，在我国有数千年的用药历史，是我... 详细信息

羌活(Notopterygii Rhizoma et Radix)是我国传统中医药体系中的常用重要药材，也是藏、羌、维、蒙等民族医药体系的重要药材，始载于《神农本草经》，列为上品，作为异名置独活项下，因产羌地而得名，在我国有数千年的用药历史，是我国最早发现和应用的药用植物之一，为历版国家药典所收载，来源于羌活(Notopterygium incisum Ting ex ***)和宽叶羌活(*** Boiss.)的干燥根茎及根，这两个种均为我国特有植物.羌活作为一种中药经典品种，目前为694个药厂生产的262种中成药的原料，在整个中医药产业中具有重要经济和社会价值.中华人民共和国成立后，羌活药材产业可分为三个时期.第一个时期是1995年以前，羌活野生药材供销平衡，因存量充实，价格平稳时期;第二个时期是1995年至2010年，羌活野生资源掠夺采挖，市场供求明显失衡，价格飙升时期，这个阶段对羌活野生资源种群造成毁灭性打击，短短10余年间羌活野生分布区急剧萎缩，药材商品形态显著下降;第三个时期是2010年至今，羌活的人工栽培研究取得进展，野生药材资源加剧濒危，市场价格高位运行.药材完全依赖野生资源的利用方式已经完全不能满足当代市场、行业和产业发展需求，羌活药材野生变家种产业化生产已经成为客观必然，已有研究结果在种子生产、种苗繁育、规模化栽培等相关技术方面，基本上能够满足产业化生产需要.从国家《中药材保护和发展规划(2015-2020年)》战略高度来看，作为一个重要的药典品种，要使中药生产企业使用产地确定的中药材原料比例达到50％，羌活野生资源产量和质量及可溯源性已经远不能满足日益扩大的市场需求和不断提高的行业要求，需要尽快推进人工种植的规模化与产业化.但是，羌活产业化发展还存在一些关键问题和瓶颈亟待解决，应加强专用基质肥料、形态调控技术等栽培环节关键技术产品及综合利用途径的研发，着力推进种源繁育与产业化基地建设.

关键词：羌活产业化种植中药材生产中药材经济

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胃苏颗粒流化床制粒工艺的研究

胃苏颗粒流化床制粒工艺的研究

引用

世界中医药学会联合会中药新药创制专业委员会成立大会暨第一届学术年会

作者：杨佳静杨云松李银薛佳顾雪梅唐鹏赵倩扬子江药业集团江苏制药股份有限公司江苏泰州225321

目的：考察胃苏颗粒流化床制粒工艺的可行性.方法：以颗粒得率、水分和生产效率的综合评分为指标,采用正交试验对影响流化床制粒过程的因素进行优化,并与湿法制粒方式进行比较.结果：流化床制粒优选的工艺为：浸膏相对密度1.15、进风温... 详细信息

目的：考察胃苏颗粒流化床制粒工艺的可行性.方法：以颗粒得率、水分和生产效率的综合评分为指标,采用正交试验对影响流化床制粒过程的因素进行优化,并与湿法制粒方式进行比较.结果：流化床制粒优选的工艺为：浸膏相对密度1.15、进风温度45～50℃、雾化压力1.0bar、料液流量15ml·min-1;与湿法制粒相比,流化床制粒可提高产品质量.结论：胃苏颗粒流化床制粒的工艺可行,可为大工业生产提供依据.

关键词：胃苏颗粒流化床制粒工艺质量控制

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