目的:针对乙型肝炎病毒X基因(Hepatitis B virus X gene,HBx)序列制备两种siRNA,载体法构建 3个shRNA表达载体和化学合成法制备一个siRNA分子,同时构建HBx表达载体pHBx,共转染人宫颈癌Hela细胞,在mRNA水平和蛋白质水平检测两种siRNA对X...
详细信息
目的:针对乙型肝炎病毒X基因(Hepatitis B virus X gene,HBx)序列制备两种siRNA,载体法构建 3个shRNA表达载体和化学合成法制备一个siRNA分子,同时构建HBx表达载体pHBx,共转染人宫颈癌Hela细胞,在mRNA水平和蛋白质水平检测两种siRNA对X基因表达的抑制作用,筛选出最有效抑制该基因的靶位点。方法:抽提HepG2.2.15细胞基因组,用PCR法获取HBx基因片段,克隆在真核表
目的:丙型肝炎病毒非结构蛋白5A(HCVNS5A)能通过多种途径激活细胞内多种与细胞增殖有关的转录因子如NF-KB、STAT-3、PCNA等并能抑制由TNF-a及p53诱导的细胞凋亡。Survivin是近年来发现的一种凋亡抑制蛋白,是凋亡抑制蛋白家族(Inhibitor of apoptosis IAP)中的新成员,也是迄今发现的最强的凋亡抑制因子。观察HCVNS5A是否通过NF-KB途径激活Survivin基因。方法:脂质体 Lipofectin2000转染pCNS5A、pDNM或pRc/CMV质粒至HepG2细胞,免疫细胞化学法(ABC法)检测
暂无评论