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第三届国际暨全国肝衰竭与人工肝学术会议

作者：李羽白雪帆徐哲魏欣第四军医大学唐都医院感染病中心第四军医大学唐都医院感染病中心第四军医大学唐都医院感染病中心第四军医大学唐都医院感染病中心

目的构建永生化胚胎肝细胞系并进行细胞移植的实验研究.方法利用SV40T基因和真核表达载体pcDNA3.1经脂质体转染至体外分离培养的人胚胎肝细胞,使其永生化,进一步鉴定其形态学特征和生物学功能.采用D-gal诱导大鼠急性肝衰竭,分3组进行治... 详细信息

目的构建永生化胚胎肝细胞系并进行细胞移植的实验研究.方法利用SV40T基因和真核表达载体pcDNA3.1经脂质体转染至体外分离培养的人胚胎肝细胞,使其永生化,进一步鉴定其形态学特征和生物学功能.采用D-gal诱导大鼠急性肝衰竭,分3组进行治疗实验,Ⅰ组:经脾脏移植永生化胎肝细胞2×107个;Ⅱ组:移植原代胚胎肝细胞2×107个;Ⅱ组:脾脏注射生理盐水1ml,各组大鼠同时肌肉注射环孢霉素A(CSA)10mg·kg-1.观察大鼠的存活率、肝脏功能、肝脏病理变化情况.结果经G418 700-300μg/ml筛选,40天后获得一株阳性克隆.形态学观察发现,该细胞具有原代培养肝细胞的大多数典型特征,细胞核型无明显异常,转染细胞在软琼脂中不能生长,免疫组化证实SV40T基因已整合入细胞,而且该细胞具有合成白蛋白的功能.移植实验表明Ⅰ组及Ⅱ组大鼠存活率均显著高于Ⅲ组大鼠,肝脏功能及肝脏病理均有改善,Ⅰ组与Ⅱ组之间大鼠存活率无明显差异.结论转染胚胎肝细胞具有与原代肝细胞类似的形态特征及生物学功能,经脾脏移植可明显改善D-gal诱导的肝衰竭大鼠的存活率,改善肝功能及肝脏病理,可以成为生物人工肝及肝细胞移植研究中的理想细胞材料.

关键词：胎肝细胞悬液肝衰竭肝细胞移植肝细胞系肝脏功能永生化

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老年人和老年性痴呆患者脑脊液松果体素昼夜和季节性节律的变化

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中华老年医学杂志 2000年第4期19卷 258-261页

作者：刘荣玉周江宁安徽医科大学第一附属医院老年病科合肥市230022

目的　研究老年性痴呆 (AD)患者和老年人松果体素昼夜和季节性节律变化。　方法　测定 85例确诊的AD患者和 82例无原发神经和精神疾病的老年人脑脊液中松果体素含量。　结果　AD组脑脊液松果体素水平为 (5 6± 7)pg/ml,明显低于老... 详细信息

目的　研究老年性痴呆 (AD)患者和老年人松果体素昼夜和季节性节律变化。　方法　测定 85例确诊的AD患者和 82例无原发神经和精神疾病的老年人脑脊液中松果体素含量。　结果　AD组脑脊液松果体素水平为 (5 6± 7)pg/ml,明显低于老年对照组〔(2 73± 47)pg/ml〕。在老年对照组中 ,年龄≥ 80岁者松果体素水平为 (176± 5 8)pg/ml,比 <80岁者〔(330± 6 6 )pg/ml〕明显降低。对照组和AD组松果体素水平的昼夜节律均消失。短日照期内对照组老年人脑脊液松果体素水平明显高于长日照期 (P =0 0 4) ,分别为 (2 37± 5 8)pg/ml和 (138± 5 9)pg/ml。 <80岁对照组老年人脑脊液松果体素水平呈现季节性改变 ,冬季和秋季松果体素水平分别是春季的 3倍 (P <0 0 0 5 )至 7倍 (P <0 0 0 2 ) ,该季节性节律在≥ 80岁的老年对照组和AD组消失。　结论　松果体素水平及其昼夜和季节性节律紊乱可能是老年人和AD患者睡眠觉醒周期等节律性行为紊乱的生物学基础。

关键词：老年性痴呆脑脊液松果体激素昼夜节律

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慢性乙型肝炎的免疫调节治疗研究进展

慢性乙型肝炎的免疫调节治疗研究进展

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第三届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议

作者：杨东亮华中科技大学同济医学院附属协和医院感染病科

慢性HBV感染的免疫发病机制还不完全清楚。对乙肝自然史的研究发现,机体免疫系统与HBV的相互作用决定着HBV感染的结局,有效的免疫学应答有助于控制病毒复制和减少肝内炎症,延缓疾病的进程。乙肝病毒特殊的生物学特点、肝脏特殊的解剖结... 详细信息

慢性HBV感染的免疫发病机制还不完全清楚。对乙肝自然史的研究发现,机体免疫系统与HBV的相互作用决定着HBV感染的结局,有效的免疫学应答有助于控制病毒复制和减少肝内炎症,延缓疾病的进程。乙肝病毒特殊的生物学特点、肝脏特殊的解剖结构和微环境,肝内过度表达的免疫负调控分子与调节性T细胞等均与HBV的持续性感染有关。此外,干扰素和核苷(酸)类似物可以通过抑制病毒复制,使受损的机体免疫应答部分恢复或者重建。因此,针对乙肝免疫发病机制中关键靶点进行免疫学调控将有助于实现HBV感染的长期免疫学控制甚至彻底清除。迄今,用于动物和人体的乙肝免疫调节治疗研究方法有多种,包括(1)免疫小分子如胸腺肽、细胞因子、免疫核糖核酸、转移因子、粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子、干扰素等;(2)治疗性疫苗如传统乙肝疫苗、乙肝表面抗原-抗体复合物疫苗、核心抗原疫苗、表位修饰疫苗、DNA疫苗等。(3)免疫细胞治疗如LAK细胞治疗、修饰后DC细胞治疗、T细胞过继治疗、以及重组TCR介导的细胞治疗等;(4)基于负调控理论的免疫调节如PD-1、CTLA-A4、Tim-3、IL-10通路拮抗剂治疗;(5)以模式识别受体为靶向的免疫调节如TLR-7、TLR-2、TLR-3激动剂治疗。上述研究有些取得了令人鼓舞的结果,但是也有许多研究并未获得预期成效。再次提示基础理论研究的创新和突破对于临床研究至关重要。对于乙肝免疫发病机制或者乙肝病毒与宿主相互作用机制的深入了解将有助于建立更有效的治疗和控制HBV感染的方法。

关键词：免疫调节治疗慢性乙型肝炎乙肝病毒

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血清S100B蛋白、TOC、MDA对利培酮治疗首发未服药精神分裂症患者疗效的影响

血清S100B蛋白、TOC、MDA对利培酮治疗首发未服药精神分裂症患者...

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中华医学会第十一次全国精神医学学术会议、第三届亚洲神经精神药理学术会议

作者：李艳丽谭云龙杨甫德陈松王志仁谭淑平杨贵刚李佳王月婵于欣周东丰北京回龙观医院北京大学精神卫生研究所

近年来,随着新的生物学技术的介入,在探索精神分裂症的病因及发病机理、精神症状的神经生物学过程等方面取得一定进展,但并无重大突破。诸多研究提示,神经元保护-损伤因素的失衡在疾病发生发展过程中作用关键。S100B是一种Ca结合蛋白,... 详细信息

近年来,随着新的生物学技术的介入,在探索精神分裂症的病因及发病机理、精神症状的神经生物学过程等方面取得一定进展,但并无重大突破。诸多研究提示,神经元保护-损伤因素的失衡在疾病发生发展过程中作用关键。S100B是一种Ca结合蛋白,主要由星型胶质细胞产生和分泌,对神经系统的发育和功能维持起重要作用,脑脊液或血清中S100B浓度升高是神经元破坏的一个敏感性的标志,它的升高提示胶质细胞的活化、神经元的死亡或血脑屏障受损。有学者发现在精神分裂症患者中血清S100B的浓度升高,而且与精神病理症状有关。而自由基含有不配对的电子,在人体内的正常生理代谢中产生,但自由基产生过量会导致细胞功能异常,细胞膜完整性受损,乃至细胞死亡。静息状态下,大脑耗氧量约占心脏输出氧的20%,且含有大量不饱和脂肪酸,儿茶酚胺自身氧化产生自由基,因而大脑容易受自由基损伤。有研究提示,S100B和机体抗氧化系统协同作用,影响患者的精神病理症状。目的①探讨首发未服药精神分裂症患者血清S100B蛋白、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)浓度和总抗氧化能力(Total anti-Oxidant Capacity,TOC)变化;分析这些生化指标间的关联及与精神病理症状的关系;②比较利培酮治疗前后血清S100B蛋白、MDA浓度和TOC的变化;③探索基线血清S100B蛋白、TOC、MDA对利培酮治疗首发未服药精神分裂症患者疗效的影响。方法共纳入首发未服药精神分裂症患者61例(疾病组),健康对照66名(对照组);疾病组采用可变剂量利培酮单药治疗8周,分别于治疗基线、第2、4、8周采用阴性和阳性症状(Positive and negative symptoms scale,PANSS)量表评定患者精神病理症状;并于治疗基线和治疗结束取空腹静脉血,采用酶联免疫吸附(Enzyme-Linked ImmunoadsordentAssay,ELISA)法检测血清S100B蛋白浓度,采用分光光度法检测MDA浓度和TOC。分析生化指标、疾病的精神病理症状、疗效间的关系。结果(1)人口学资料:疾病组共纳入首发未服药精神分裂症患者61例(男32例,女29例),年龄(27.3±7.7)岁,发病年龄(24.6±6.2)岁,总病程(48.9±56.5)月;对照组66例(男34例,女32例),年龄(27.4±5.5)岁。2组性别比、年龄无显著差异(P>0.05)。(2)疾病组与对照组S100B、TOC、MDA比较及治疗前后变化:疾病组S100B、TOC显著高于对照组,MDA浓度显著低于对照组(P<0.05);经8周治疗患者血清S100B、TOC、MDA均显著下降,其中MDA下降最为明显(见表1)。(3)利培酮疗效:经8周治疗,患者精神病性症状显著改善,将减分率≥50%定义为显著改善,>30为有效,治疗8周的有效率为88.5%,显著改善率为62.3%,第8周利培酮的治疗剂量为(4.30±1.24)mg/d。(4)基线血清S100B、TOC、MDA间及与精神病理症状的关系:相关分析结果提示,S100B浓度与TOC、MDA、病程、PANSS阴性症状分、PANSS总分显著相关,TOC与S100B浓度、PANSS阴性症状分、PANSS总分显著相关。S100B与机体抗氧化系统可能存在某种协同作用,共同影响精神分裂症患者精神病症状。(5)血清S100B、TOC、MDA对疗效的影响:S100B浓度与PANSS减分率显著负相关,TOC与减分率相关趋于显著水平(P=0.055);此外,病程与PANSS减分率显著负相关(见表2)。结论首发精神分裂症患者S100B与机体抗氧化体系可能存在交互作用,共同影响疾病症状和抗精神病药物对患者的治疗反应。

关键词：利培酮精神分裂症患者 MDA S100B TOC

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替比夫定对HepG2细胞表达CD133和AFP的影响

替比夫定对HepG2细胞表达CD133和AFP的影响

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第三届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议

作者：王立巍艾迎春袁禧先卓越陆基华黄绍萍邱趁丽程计林上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心消化科吉林医药大学附属医院消化科佳木斯大学附属第一医院消化科

目的:探讨核苷类药物替比夫定对肝癌细胞株HepG2肿瘤干细胞标志分子CD133和甲胎蛋白(AFP)的影响。方法:本研究以HepG2细胞为实验细胞,实验分为两组:实验组(与替比夫定共育组)和对照组(单纯细胞组)。实验组加入含替比夫定(10umol/L)培养... 详细信息

目的:探讨核苷类药物替比夫定对肝癌细胞株HepG2肿瘤干细胞标志分子CD133和甲胎蛋白(AFP)的影响。方法:本研究以HepG2细胞为实验细胞,实验分为两组:实验组(与替比夫定共育组)和对照组(单纯细胞组)。实验组加入含替比夫定(10umol/L)培养液与细胞共育,对照组只加不含替比夫定细胞培养液培养。隔天更换细胞培养液。培养细胞至80-90%铺满培养瓶时,收集细胞。1)4×10～5细胞/ml被用于流式细胞仪双染法检测HepG2细胞表面CD133的表达:2)1×10～7细胞/ml被用于化学发光免疫检测细胞内AFP含量;3)1×10～7细胞/ml被用于提取RNA,等量的RNA分别被用于实时荧光定量聚合酶链反应(Real-Time PCR)检测细胞内CD133和AFP的表达。每组细胞三个培养瓶,重复3次,将各次实验数值取均数,用于统计学处理。结果:1)流式细胞仪检测:替比夫定组和对照组的CD133阳性细胞的表达率分别为0.83%±0.02%和1.9%±0.04%;2)化学发光免疫分析法测得两组细胞内AFP的数值分别为:149.07±3.57(μg/L)和180.32±3.92(μg/L);3)定量PCR检测,替比夫定组和对照组HepG2细胞CD133 mRNA和AFP mRNA的表达分别为:0.609±0.057和0.956±0.132,1.061±0.034和2.507±1.379。统计学t检验处理各实验数据,CD133阳性细胞率、AFP值、及CD133 mRNA和AFP mRNA的表达,替比夫定组和对照组间均存在显著性差异(p<0.05),替比夫定与HepG2细胞共育后CD133和AFP的表达均减少。结论:替比夫定抑制HepG2细胞的肿瘤干细胞标志分子CD133的表达,降低AFP合成,这可能是核苷类药物治疗肝炎延缓肝癌发生的分子生物学机制之一。

关键词：肝癌 CD133 甲胎蛋白替比夫定

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淋巴细胞趋化因子基因修饰的小鼠肝癌树突状细胞融合瘤苗抗肿瘤的实验研究

淋巴细胞趋化因子基因修饰的小鼠肝癌树突状细胞融合瘤苗抗肿瘤的...

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第三届国际暨全国肝衰竭与人工肝学术会议

作者：郑树森张浩浙江大学医学院附属第一医院肝胆胰外科卫生部多器官联合移植研究重点实验室浙江大学医学院附属第一医院肝胆胰外科卫生部多器官联合移植研究重点实验室

原发性肝癌(HCC hepatocellular carcinoma)是我国最常见的恶性肿瘤之一,不但发病率及病死率极高,而且治疗困难,预后极差。目前肝癌的治疗主要采用以手术治疗为主的综合治疗方案。虽然医学影像技术的快速发展、外科手术技术及围手术期... 详细信息

原发性肝癌(HCC hepatocellular carcinoma)是我国最常见的恶性肿瘤之一,不但发病率及病死率极高,而且治疗困难,预后极差。目前肝癌的治疗主要采用以手术治疗为主的综合治疗方案。虽然医学影像技术的快速发展、外科手术技术及围手术期管理水平的不断提高、肝移植临床逐步推广应用以及不能切除肝癌的缩小后切除使肝癌的早期诊断率及手术切除率有了明显的提高,但术后较高的复发及转移率是影响手术治疗中、远期效果的主要原因。迄今为止肝癌的复发及转移仍无有效的预防和治疗方法,如何进一步深化肝癌生物学特性研究,积极寻找有效的预防和治疗肝癌复发和转移的措施是肝癌研究的一个重要目标。在现代分子生物学和基因工程技术飞速发展的推动下,以免疫治疗为基础发展而来的生物治疗日益受到重视,显示良好的应用前景,可望成为除手术、放疗和化疗这三大治疗模式之外的肝癌治疗第四模式。研究表明,树突状细胞(DC dendritic cell)是目前己知最强有力的专职抗原提呈细胞,不但表达丰富的MHC(MHC major histocompatibility complex)Ⅰ、Ⅱ类分子、共刺激分子及粘附分子,而且高水平分泌IL-1(interleulin-1),TNF-α(tumor necrosis factor-α),IL-12等细胞因子,启动T细胞介导的免疫应答特别是杀伤性T淋巴细胞(CTL cytotoxic T lymphocyte)介导的免疫反应,在机体抗肿瘤免疫中发挥重要作用。以肿瘤抗原体外致敏DC,使之持续高水平表达肿瘤抗原表位,然后将负载有肿瘤抗原的致敏DC回输至荷瘤机体,通过MHC Ⅰ、Ⅱ类分子途径交叉递呈抗原,以有效地诱导机体产生特异及非特异性的抗肿瘤免疫应答,是目前肿瘤治疗的一条有效途径。随着体外大量培养DC方法的成熟,以DC为基础的抗肿瘤疫苗正成为研究的热点。目前对DC进行处理,使其表达肿瘤抗原的常用方法有:肿瘤特异性抗原基因修饰,肿瘤抗原肽或粗提物冲击,肿瘤DNA或mRNA冲击。虽然在动物及临床试验中取得了一定的治疗效果,但由于目前明确鉴定的肿瘤特异性抗原数量较少,抗原肽及核酸冲击的稳定性差、表达时间短以及致自身免疫性疾病可能等限制了上述方法的临床应用。因此,如何进一步研究加强机体抗肿瘤免疫效应,提高肿瘤抗原基冈转染的DC瘤苗的疗效具有重要的实践意义。1997年Gong等首次将DC与肿瘤细胞融合制备肿瘤疫苗,为疫苗的研究开拓了崭新的视野。2000年Kugler等利用此技术构建人肾癌树突状细胞融合瘤苗用于转移性肾癌的治疗取得了较好的疗效,为融合瘤苗的临床应用展示了广阔的前景。目前有关肝癌树突状细胞融合瘤苗研究较少,而以淋巴细胞趋化因子(lymphotactin,Lptn)基因修饰肝癌树突状细胞融合瘤苗的研究尚未见报道。本实验通过构建小鼠Lptn基因修饰的肝癌树突状细胞融合瘤苗,研究其生物学特性,体内、外诱导免疫应答能力及可能的杀肿瘤机制。为充分利用基因修饰的树突状细胞融合瘤苗预防和治疗肝癌的复发及转移奠定基础。

关键词：肝癌细胞凋亡肿瘤疫苗免疫治疗

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H3K27 Trimethylation is an Early Epigenetic Event of p16NK4a Silencing for Regaining Tumorigenesis in Fusion Reprogrammed Hepatoma Cells

H3K27 Trimethylation is an Early Epigenetic Event of p16NK4a...

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者： YAO Jia-yi ZHANG Lei ZHANG Xin MA Yue HE Zhi-ying HUI Li-jian WANG Xin HU Yi-ping Key Laboratory of Molecular & Cellular Biology Shanghai Institutes for Biological SciencesChinese Academy of SciencesShanghai 200031China Key Laboratory of Molecular & Cellular BiologyShanghai Institutes for Biological SciencesChinese Academy of SciencesShanghai 200031China Institute of BiophysicsChinese Academy of SciencesBeijing 100101China Department of Cell BiologySecond Military Medical UniversityShanghai 200433China Department of Cell Biology Second Military Medical UniversityShanghai 200433China

Stable epigenetic silencing of p16INK4ais a common event in hepatocellular carcinoma (HCC) cells,which is associated with abnormal cell proliferation and liberation from cell cycle *** the early epigenetic events in silencing p1INK4a expression may illuminate a prognostic strategy to block HCC *** this end,we created a reprogrammed cell model by the fusion of mouse HCC cells with mouse embryonic stem cells,in which the ES-Hepa hybrids forfeited characteristics of HCC cells along with reactivation of the silenced *** characteristics,in terms of gene expression pattern and tumorigenic potential,were restored upon induced differentiation of these reprogrammed ES-Hepa hybrids.

关键词： cell differentiation embryonic stem cell histone methylation tumor suppressor p16INK4a tumorigenesis

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第三届全国再生医学(干细胞与组织工程)学术研讨会暨第二届全国血管外科与组织工程专题研讨会(第一轮)会议通知

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中华疝和腹壁外科杂志（电子版） 2007年第1期1卷 63-63页

各位朋友,各位同道:20世纪90年代以来,随着细胞生物学、分子生物学、免疫学以及遗传学等基础学科的迅猛发展以及干细胞和组织工程技术在现代医学基础研究和临床中的应用,使得现代再生医学已初步显示出良好的发展前景。在国际上,再生医... 详细信息

各位朋友,各位同道:20世纪90年代以来,随着细胞生物学、分子生物学、免疫学以及遗传学等基础学科的迅猛发展以及干细胞和组织工程技术在现代医学基础研究和临床中的应用,使得现代再生医学已初步显示出良好的发展前景。在国际上,再生医学已经成为当今生物学和医学关注的焦点和研究的热点。

关键词：学术研讨会干细胞专题研讨会医学现代医药学中华医学会医学工程学分会血管外科

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第三届全国再生医学(干细胞与组织工程)学术研讨会暨第二届全国血管外科与组织工程专题研讨会(第一轮)会议通知

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中华损伤与修复杂志（电子版） 2007年第2期2卷 109-109页

关键词：学术研讨会干细胞专题研讨会医学现代医药学中华医学会医学工程学分会血管外科

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The Existence of Multipotent Stem Cells with Epithelial-mesenchymal Transition Features in the Human Liver Bud

The Existence of Multipotent Stem Cells with Epithelial-mese...

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者： SU Juan LIU Fang-xia XU Jun LAU Joseph T.Y. HU Yi-ping YOU Pu LI Wen-lin TAO Xin-rong ZHU Hai-ying YAO Yu-cheng YU Hong-yu HAN Qing-wang YU Bing Department of Cell Biology Second Military Medical UniversityXiangyin Rd.800Shanghai 200433PR China Department of PathologyNo.105 Hospital of PLAHefei 230031PR China Department of Molecular and Cellular BiologyRoswell Park Cancer InstituteBuffaloNew YorkNY 10021United States Department of Cell BiologySecond Military Medical UniversityXiangyin Rd.800Shanghai 200433PR China Division of Cardiology University of CaliforniaLos AngelesCA 90095United States Department of PathologyChangzheng HospitalFengyang Rd.415Shanghai 200003PR China

During the early stage of embryonic development,the liver bud, arising from the foregut endoderm,is the beginning for the formation of future hepatic three-dimensional *** the gene expression profiles associated with this developmental stage have been well explored,the detailed cellular events are not as ***-mesenchymal transition (EMT) was thought to be essential for cell migration in the early vertebrate embryo but seldom demonstrated in human liver *** this study,we tried to identify the cell populations with both stem cell and EMT features in the human liver *** in situ studies show that the phenotype of EMT occurs at the initiation of human liver development,accompanied by up-regulation of EMT-associated genes.A human liver bud-derived stem cell line (hLBSC) was established,which expressed not only genes specific to both mesenchymal cells and hepatic cells,but also octamer-binding protein 4 (OCT4) and *** in appropriate media,hLBSC differentiated into hepatocytes, adipocytes,osteoblast-like cells and neuron-like cells in *** transplanted into severe combined immunodeficiency mice pre-treated by carbon tetrachloride,hLBSC engrafted in the liver parenchyma and *** data suggest that there are cell populations with stem cell and EMT-like properties in the human liver bud, which might play an important role in the beginning of the spatial-structure construction of the liver.

关键词： epithelial-mesenchymal transition liver bud liver development multipotent stem cells fetal liver

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