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排序：

The role of upstream stimulatory factor 1 in the transcriptional regulation of the human TBX21 promoter mediated by the T-1514C polymorphism associated with systemic lupus erythematosus

The role of upstream stimulatory factor 1 in the transcripti...

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第二届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议

作者： Junggang Li Jirong Li Yi You Song Chen Institute of Infectious Diseases Southwest HospitalThird Military Medical University Medical Team Force 75135 of Chinese People's Liberation ArmyGuigang Municipality Department of Dermatology Southwest HospitalThird Military Medical University

Abstract T-bet is a key regulator for the lineage commitment in CD4 T helper（Th） 1 cells by activating the hallmark production of interferon-γ.Previously,two single nucleotide polymorphisms（SNPs） in the TBX21 promoter, T-1993C and T-1514C,have been shown by statistic studies to associate with systemic lupus erythematosus（SLE）.The effect of-1993 SNP on the Yin Yang 1 transcription factor- mediated promoter activity has been already *** study aimed to investigate roles of the T-1514C SNP on TBX21 transcription and its functional effect by luciferase reporter,electrophoretic mobility shift assay（EMSA）,chromatin immunoprecipitation（ChIP） assay,and flow cytometric analysis of intracellular T-bet,IFN-y,and IL-4 expression in activated CD4 T *** TBX21 promoter carrying -1514C possessed significantly lower transcriptional activity than that of-1514T and was markedly downregulated by the overexpression of upstream stimulatory factor 1（USF-1） when compared with the promoter carrying -*** indicated that the transcription factor USF- 1 was bound to the -1514C allele probe with the affinity higher than that to the -1514T allele *** assay suggested that USF-1 bound around -1514 of TBX21 genomic DNA in vivo in the human T cell line Jurkat with -1514C/*** individuals carrying -1514C allele were determined to have significantly diminished expression of T-bet and IFN-y and increased IL-4 production in CD4 T cells compared with those of -1514T *** findings demonstrate that the T-1514C polymorphism affects TBX21 gene expression and Thl cytokine production by binding USF-1 to the SNP site.

关键词： TBX21 Single nucleotide polymorphism Gene regulation Systemic lupus erythematosus

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The molecular mechanism of SREBP-1c expression regulated by HCV core protein

The molecular mechanism of SREBP-1c expression regulated by ...

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第二届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议

作者： LI Min WANG Qi ZHANG Jin-qian CHENG Jun Capital Medical University Beijing DiTan Hospital Infectious Disease Institute

Objective To investigate the molecular mechanism of SREBP-lc expression regulated by HCV core protein. Methods construct pcDNA3.1/myc-His(-)-Core(1b,3a) and transfect HepG2 cells,determine the mRNA and protein expression level of SREBP-lc and Sirtl by real time PCR and Western blot 48h *** pGL4.10-Sirtl and co-transfect HepG2 cells with pcDNA3.1/myc- His(-)-Core(1b,3a),measure the Sirtl promoter activity by Luciferase assay 24h post-transfection. construct pmirGLO-SREBP-1c-3' -UTR and co-transfect HepG2 cells with pcDNA3.1/myc-His(- )-Core(3a),measure the relative luciferase activity of SREBP-lc-3' -UTR by Luciferase assay 48h post-transfection. Results HCV core proteins(lb,3a) up-regulate the mRNA level(1.358 times and 1.337 times respectively,n=3,p<0.05) and protein expression(1.608 times and 1.926 times respectively,n=3, p<0.05) of *** HCV core proteins of genotype lb and 3a up-regulate the mRNA level (1.566 times and 1.71 times respectively,n=3,p<0.05) and protein expression(1.436 times and 1.588 times respectively,n=3,p<0.05) of *** Sirtl promoter did not show significant transcriptional activity in the presence of HCV core proteins(1b,3a).The relative luciferase activity of SREBP-1c- 3' -UTR shown significant decrease in the presence of HCV core protein of genotype 3a(RQ=0.667, n=3,p<0.05).Conclusion HCV core proteins up-regulate the mRNA and protein expression level of SREBP-lc and Sirtl,which may be one of the pathogenesis of HCV related *** the regulation of SEBP-1c by HCV core protein,microRNA may play an role of *** there are microRNAs contribute to the regulation of Sirtl by HCV core protein still need to be investigated.

关键词： HCV core protein Sirt1 SREBP-1c microRNA

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Entecavir Treatment Prevents Disease Progression in HBV Related Acute-on-Chronic Liver Failure:Establishment of a Novel Logistical Regression Model.

Entecavir Treatment Prevents Disease Progression in HBV Rela...

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第二届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议

作者： Wei Guo Ke Ma Meifang Han Guang Chen Tao Chen Zenguang Wu Daofeng Yang Jiaquan Huang Yuancheng Huang Xiping Zhao Deying Tian Jianxin Song Junying Qi Qin Ning Department of Infectious Disease Tongji Hospital of Tongji Medical CollegeUniversity of Science and Technology

Background/Aims:Hepatitis B related acute-on-chronic liver failure has a poor prognosis with very high ***,most prognostic predictive models of liver failure are complicated and offer suboptimal *** in entecavir-treated patients with HBV-ACLF is limited. This study was designed to evaluate the efficacy and safety of entecavir in patients with HBV-ACLF and to develop a novel model(Tongji prognostic predictory model,TPPM) for prognostic prediction of HBV-ACLF patients. Methods:In this retrospective study,248 patients with HBV-ACLF were *** were no signifcant differences in baseline clinical and virological characteristics between patients treated with and without entecavir. Results:The 1- and 3-month survival rates of patients in the entecavir-treated group were 72.58%and 61.29%,significantly higher than that in NA-free group which were 53.23%and 45.97%. The entecavir-treated group also achieved a better improvement of MELD score when compared with the *** multivariate logistic regression,high INR for prothrombin time,≥2 Complications and high total bilirubin,but not HBV DNA,were independent predictors of liver-related mortality. By Hosmer and Lemeshow test,TPPM for HBV-ACLF with a very good degree of fit with disease *** on this unique group of patients,the TPPM scoring offered a better prediction value in both specificity and sensitivity for 3-month mortality of patients with HBV-ACLF compared with MELD scoring system with statistically significant *** the patients with HBV-ACLF,using a cutoff of 0.22 for 3-month predicted mortality by TPPM,the positive predictive value was 93.6%, with a negative predictive value of 91.3%. Conclusions:Entecavir treatment prevents disease progression and increased the survival of patients with *** established TPPM scoring system offers superior predictoiy value in both specificity and sensitivity for HBV-ACLF patients when compared with MELD.

关键词： HBV Entecavir Treatment Prevents Disease Progression in HBV Related Acute-on-Chronic Liver Failure:Establishment of a Novel Logistical Regression Model Model

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乙型病毒性肝炎相关慢加急性肝衰竭的血清细胞因子谱特征

乙型病毒性肝炎相关慢加急性肝衰竭的血清细胞因子谱特征

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第二届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议

作者：胡小雄马世武高洪波黄璇朱晓琳杨玲许敏侯金林南方医科大学附属南方医院感染内科广州市第八人民医院

背景/目的乙型病毒性肝炎相关慢加急性肝衰竭(HB-ACLF)发病机理目前尚不清楚。严重的炎症反应和免疫功能紊乱是HB-ACLF的重要特征,而细胞因子网络是炎症及免疫反应的重要效应因子。分析患者的细胞因子谱特征,有助于探索HB-ACLF发病机理... 详细信息

背景/目的乙型病毒性肝炎相关慢加急性肝衰竭(HB-ACLF)发病机理目前尚不清楚。严重的炎症反应和免疫功能紊乱是HB-ACLF的重要特征,而细胞因子网络是炎症及免疫反应的重要效应因子。分析患者的细胞因子谱特征,有助于探索HB-ACLF发病机理,为临床判断患者预后进行早期干预提供新的免疫学指标。方法本研究纳入39例HB-ACLF(存活22例,死亡17例)、20例轻度慢性乙型肝炎(M-CHB)、20例重度慢性乙型肝炎(S-CHB)及10例健康对照,其中7例HB-ACLF存活患者连续观察两个月(起病后2～4周、4～6周、6～8周3个时间点)。收集各研究对象临床资料并采集外周血10ml,离心分离血清,分装后-80℃冻存。用流式微球试验(CBA)批量检测血清中15种细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、IL-17、IL-23、CXCL-9、CXCL-10、CCL-2、CCL-5和MIP-1β)水平。统计分析在不同患者群中各种细胞因子水平(中位数,pg/ml)的差异,及其在HB-ACLF存活患者恢复过程中的动态变化,并分析其与疾病严重程度的相关性。结果各组人群横向比较:与M-CHB相比,HB-ACLF患者血清IFN-γ(2.9 vs.2.4,P=0.031)、TNF-α(2.9 vs.2.1,P=0.046)、IL-6(9.0 vs.2.8,P<0.001)和IL-17(19.7 vs.12.0,P=0.006)水平显著升高,而IL-23(28.0 vs.32.7,P=0.033)和CXCL-9(62.5 vs.230.5,P<0.001)则显著下降;与S-CHB相比,HB-ACLF患者血清IFN-γ(2.9 vs.2.4,P=0.026)、TNF-α(2.9 vs.2.2,P=0.006)、IL-6(9.0 vs.3.9.,P=0.001)亦显著升高,CXCL-9(62.5 vs.203.9,P<0.001)显著降低。HB-ACLF死亡患者血清IL-2(3.8 vs.3.2,P=0.021)、IL-6(13.1vs.6.6,P=0.028)和IL-10(5.2 vs.3.4,P=0.008)水平显著高于存活患者。HB-ACLF存活患者血清细胞因子水平的动态变化:随病情缓解,IFN-γ(3.2 vs.2.4 vs.2.6,P=0.046)、IL-12(2.9vs.1.9 vs.1.5,P=0.018)和IL-17(20.0 vs.11.2 vs.19.7,P=0.034)显著下降,而IL-23(25.6vs.36.4 vs.40.3,P=0.020)则显著升高。HB-ACLF患者血清细胞因子水平与疾病严重程度的相关关系发现:IFN-γ(R=0.295,P=0.008)、IL-2(R=0.222,P=0.049)、IL-6(R=0.537,P<0.001)和IL-17(R=0.393,P<0.001)与MELD积分呈正相关,而CXCL-9与MELD积分呈负相关(R=-0.466,P<0.001)。结论 HB-ACLF患者血清细胞因子水平严重紊乱,其变化趋势与疾病严重程度及预后密切相关。

关键词：慢加急性肝衰竭细胞因子水平疾病严重程度 IFN 动态变化细胞因子谱乙型病毒性肝炎

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HCV感染下调CD59表达促进补体介导的肝细胞损伤

HCV感染下调CD59表达促进补体介导的肝细胞损伤

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第二届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议

作者：杭小峰徐文胜倪武缪晓辉第二军医大学长征医院感染科

目的明确HCV感染对肝细胞CD59表达的调控效应及其对补体介导的肝细胞损伤的影响,探讨HCV感染下调肝细胞CD59表达的分子机制。方法 (1)采用实时荧光定量PCR、Western blot观察丙型肝炎患者肝组织及HCVcc感染的Huh7.5细胞中CD59的含量,观... 详细信息

目的明确HCV感染对肝细胞CD59表达的调控效应及其对补体介导的肝细胞损伤的影响,探讨HCV感染下调肝细胞CD59表达的分子机制。方法 (1)采用实时荧光定量PCR、Western blot观察丙型肝炎患者肝组织及HCVcc感染的Huh7.5细胞中CD59的含量,观察HCVcc感染后Huh7.5细胞CDC(补体依赖的细胞毒作用)效应的变化。(2)多个软件联合预测可能的CD59转录因子和可能调控CD59表达的miRNA,观察HCV感染后CD59相关转录因子表达水平及部分转录因子的磷酸化水平;观察丙型肝炎患者肝组织和Huh7.5细胞感染HCVcc后相关miRNA表达水平,在Huh7.5细胞中采用反义的寡核苷酸沉默CD59表达相关的miRNA观察对CD59表达的影响。结果 (1)HCV感染后CD59mRNA表达水平及蛋白表达水平均下降;HCVcc感染后Huh7.5细胞CDC效应增加。(2)HCV感染后肝细胞中转录因子CREB1、AP-1与SP1基因表达量无明显差异,CREB1磷酸化水平下降;HCV感染后肝细胞hsa-let-7b及hsa-let-7i含量明显升高,在Huh7.5细胞中转染反义的寡核苷酸anti-hsa-let-7i后CD59表达明显升高。结论 (1)HCV感染下调肝细胞CD59表达,并导致肝细胞CDC效应增加,提示CD59表达的下调可能参与HCV感染导致的肝脏炎症损伤过程。(2)HCV感染可能通过下调CREB1磷酸化水平、上调hsa-let-7i调控CD59表达。

关键词：丙型肝炎病毒感染肝损伤补体 CD59 补体依赖的细胞毒作用转录微小RNA

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9HBV X基因转染L02细胞及其蛋白产物对CⅡTA和HLA-DR表达的影响

9HBV X基因转染L02细胞及其蛋白产物对CⅡTA和HLA-DR表达的影响

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第二届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议

作者：张卿李俊刚刘玉元赵博张绪清第三军医大学西南医院全军感染病研究所

目的探讨脂质体和电穿孔法在HBV X基因转染L02细胞中的差别及X基因蛋白产物对CⅡTA和HLA-DR表达的影响。方法构建HBV X基因重组表达质粒,通过电穿孔和脂质体法转染人正常肝细胞L02细胞,以绿色荧光蛋白(enhance green fluorescent protei... 详细信息

目的探讨脂质体和电穿孔法在HBV X基因转染L02细胞中的差别及X基因蛋白产物对CⅡTA和HLA-DR表达的影响。方法构建HBV X基因重组表达质粒,通过电穿孔和脂质体法转染人正常肝细胞L02细胞,以绿色荧光蛋白(enhance green fluorescent protein,EGFP)表达水平评价转染效率,流式细胞技术检测L02细胞HBV X蛋白的表达水平。RT-PCR、流式细胞技术及western-blot分析L02细胞、转染空载体以及转染HBV X基因重组表达质粒的L02细胞CⅡTA和HLA-DR的表达差别。结果采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000的转染效率为(6.4±3.5)%,显著低于电穿孔法(41.46±5.8)%,P<0.01。脂质体法转染的L02细胞HBVX蛋白表达水平为(5.1±3.9)%,显著低于电穿孔方法(37.5±4.1)%表达,P<0.01。转染了HBVX基因重组表达质粒的L02细胞检测到CⅡTA和HLA-DR mRNA和蛋白表达,而L02细胞本身及转染空载体的L02细胞未检测到CⅡTA和HLA-DR的表达。结论 HBV X基因真核表达载体pHBx-IRES2-EGFP通过电穿孔法转染L02细胞较脂质体法有明显较高的转染效率和更高的目的基因的表达,HBV X基因诱导了L02细胞中CⅡTA和HLA-DR的表达。

关键词： HBV X基因脂质体电穿孔 HLA-DR CIITA

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乙型脑炎病毒C蛋白编码基因重组质粒构建与表达

乙型脑炎病毒C蛋白编码基因重组质粒构建与表达

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第二届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议

作者：王志峰翟永贞周立夫常彩芳王玉楠冯国和中国医科大学附属盛京医院感染科

目的构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)C蛋白编码基因重组子并鉴定。方法以JEV SA14-14-2株Total RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增JEV C蛋白编码基因,基因两侧加入起始密码子以及终止密码子。切胶回收PCR产物并经"A"处理,将PCR产物与... 详细信息

目的构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)C蛋白编码基因重组子并鉴定。方法以JEV SA14-14-2株Total RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增JEV C蛋白编码基因,基因两侧加入起始密码子以及终止密码子。切胶回收PCR产物并经"A"处理,将PCR产物与pMD19-T simple连接构建重组子pMD-JC并测序。为便于分析JEV C蛋白编码基因重组子在哺乳动物细胞中的表达,在JEV C蛋白编码基因5'端附加FLAG序列,并亚克隆至pcDNA3.1(+)载体中,构建重组子pJC并经酶切及DNA测序分析。脂质体法将pJC转染中华仓鼠卵巢(CHO)细胞。免疫荧光检测转染的CHO细胞中JEV C蛋白分布与表达。结果以流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株Total RNA为模板,RT-PCR法获得含有FLAG片段的JEV C蛋白编码基因重组子,测序分析与发表的基因序列相符合。经酶切鉴定表明:重组质粒pJC经BamH I/EcoR I酶切释出的插入子在500bp左右,与JEVC蛋白编码基因和FLAG基因序列之和(414bp)相一致。应用pcDNA3.1 T7噬菌体启动子引物测序分析目的基因在真核表达载体中正常连接。JEV C蛋白编码基因重组质粒转染的CHO细胞可见较显著绿色荧光标记,主要分布胞浆,胞膜。单纯载体转染或未进行转染的CHO细胞中未见特异性绿色荧光标记,仅见散在的无特异性绿色荧光杂质。结论 pJC成功构建,转染的CHO细胞可表达JEV C蛋白。

关键词：流行性乙型脑炎病毒 CHO JEV 重组子编码基因重组质粒构建

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HCV核心蛋白调控SREBP-1c表达水平的机制研究

HCV核心蛋白调控SREBP-1c表达水平的机制研究

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第二届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议

作者： LI Min 李敏 WANG Qi 王琦 ZHANG Jin-qian 张锦前 CHENG Jun 成军 Capital Medical University Beijing DiTan Hospital Infectious Disease Institute 首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所

目的：探讨HCV核心蛋白调控SREBP-1c的分子生物学机制。方法：构建HCV核心蛋白真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)-Core(1b,3a),转染HepG2细胞系,48h后提取细胞总RNA和总蛋白,采用real time PCR、Western blot等方法检测脂代谢相关基因Si... 详细信息

目的：探讨HCV核心蛋白调控SREBP-1c的分子生物学机制。方法：构建HCV核心蛋白真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)-Core(1b,3a),转染HepG2细胞系,48h后提取细胞总RNA和总蛋白,采用real time PCR、Western blot等方法检测脂代谢相关基因Sirt1和SREBP-1c的mRNA和蛋白表达水平;构建pmirGLO-SREBP-1c-3'-UTR报告基因表达载体,与pcDNA3.1/myc-His(-)-Core(3a)共转染HepG2细胞系48h后检测SREBP-1c-3’-UTR相对luciferase活性.结果：与对照组相比，HCV核心蛋白表达组SREBP-1c-3’-UTR相对luciferase活性下调(相对值为0.667,n=3,p<0.05)。结论：表达1b型和3a型HCV核心蛋白后可上调SREBP-lc和Sirt 1的mRNA及蛋白表达水平，通过Luciferase assay发现：microRNA在核心蛋白对SREBP-lc的调控过程中发挥了抑制作用，提示核心蛋白对SREBP-1。的调控错综复杂，既有正向激活作用也有反向抑制作用，最终SREBP-lc的上调是其综合作用的结果。

关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白调控基因载体蛋白表达

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国产仿制抗病毒药物治疗我国HⅣ/AIDS患者2年的疗效和安全性研究

国产仿制抗病毒药物治疗我国HⅣ/AIDS患者2年的疗效和安全性研究

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第二届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议

作者：吕玮韩杨郭伏平邱志峰姜晶梅匡季秋戴懿左铃燕李雁翎刘正印李太生中国医学科学院北京协和医院感染科北京王府井大街帅府园1号中国医学科学院中国协和医科大学医学统计室

目的：探讨我国HIV/AIDS患者接受NVP为核心的国产仿制药物的三种组合方案,进行治疗2年的临床疗效、免疫学和病毒学疗效以及药物安全性和毒副作用的评估和比较,以确定适合我国国情的一线抗病毒治疗方案。方法：筛选362名HIV/AIDS患者,19... 详细信息

目的：探讨我国HIV/AIDS患者接受NVP为核心的国产仿制药物的三种组合方案,进行治疗2年的临床疗效、免疫学和病毒学疗效以及药物安全性和毒副作用的评估和比较,以确定适合我国国情的一线抗病毒治疗方案。方法：筛选362名HIV/AIDS患者,198例患者符合人组标准,随机纳入三个治疗组,用药方案分别为A：NVP/AZT/ddl;B：NVP/3TC/D4T;C：NVP/AZT/3TC.应用SPSS 11.0统计学软件对计数资料和计量资料进行分析统计.结果：115例HIV/AIDS患者完成了为期2年维持同一治疗方案不变的抗病毒治疗,失访率为12.6％.治疗1年结束时各组CD4细胞上升绝对数值之间无显著差异;10名患者因肝功能受损而退出治疗,其中7名患者属于方案A组,约45.1％发生在抗病毒起始的3个月内.结论：本研究为国内较大规模、前瞻性、多中心的评价国产抗病毒治疗方案疗效和安全性的研究,结果证实目前国内流行的以NVP为核心的一线抗病毒方案具有较好的有效性和安全性,并优化出适合目前我国国情的方案为NVP/AZT/3TC和NVP/3TC/d4T.

关键词：乙型肝炎艾滋病抗病毒治疗奈韦拉平临床疗效

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北京朝阳医院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因及同源性分析

北京朝阳医院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因及同源性分...

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第二届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议

作者：郭萍曹彬尹玉东刘颖梅栗方

目的研究北京朝阳医院近三年临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型,了解我院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌感染现状。方法收集我院2006年-2009年7月临床分离存活的非重复的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌,进行... 详细信息

目的研究北京朝阳医院近三年临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型,了解我院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌感染现状。方法收集我院2006年-2009年7月临床分离存活的非重复的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌,进行扩增性rDNA限制性酶切片段分析(ARDRA)分子鉴定菌种,采用琼脂稀释法测定菌株对美罗培南、亚胺培南等抗菌药物的MIC;采用基因间重复序列引物PCR(REP-PCR)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析同源性;用多重PCR、测序等方法分析鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶包括TEM-1型酶、SHV-型酶、GES-型、VEB-型、PER-型及IMP-、VIM-型碳青霉烯酶和OXA型碳青霉烯酶分布特点。结果 274株CRAB对头孢菌素类、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、喹喏酮类敏感率<10%,米诺环素为41.2%;对多粘菌素B 100%敏感。2006年-2009年7月发现有五个克隆,主要为A1耐药克隆株于不同病房的暴发流行。β-内酰胺酶检测出OXA-23、-24、58型碳青霉烯酶及PER-1型酶。blaOXA-23-like与blaOXA-51-like基因同时存在53.6%(147/274)。未检出IMP-、VIM-型碳青霉烯酶及TEM-1型酶、SHV-型酶、GES-型、VEB-型β-内酰胺酶结论CRAB克隆株的传播是造成我院碳青霉烯类耐药率增加的重要原因。OXA-51-like、OXA-23型酶为对我院CRAB对碳青霉烯类耐药的主要碳青霉烯酶。

关键词：鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因耐碳青霉烯类克隆株 OXA 同源性分析亚胺培南耐药敏感率北京朝阳医院

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