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饲料n-6/n-3多不饱和脂肪酸比例变化对小鼠脑聚集DHA的影响

饲料n-6/n-3多不饱和脂肪酸比例变化对小鼠脑聚集DHA的影响

引用

中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会

作者：樊超男朱海燕徐锋齐可民张峰首都医科大学附属北京儿童医院儿研所营养中心首都医科大学附属北京儿童医院保健中心

目的探讨饲料n-6/n-3 PUFAs比例变化对脑聚集DHA的影响,同时对Δ6、Δ5去饱和酶以及一些转录因子的表达进行观察。方法使用清洁级C57BL/6J雌性小鼠,自生后3-4周分别给予4种不同比例n-6/n-3脂肪酸饲料(脂肪含量6%),即n-6/n-3PUFAs(20:1)... 详细信息

目的探讨饲料n-6/n-3 PUFAs比例变化对脑聚集DHA的影响,同时对Δ6、Δ5去饱和酶以及一些转录因子的表达进行观察。方法使用清洁级C57BL/6J雌性小鼠,自生后3-4周分别给予4种不同比例n-6/n-3脂肪酸饲料(脂肪含量6%),即n-6/n-3PUFAs(20:1)、n-6/n-3 PUFAs(10:1)、n-6/n-3 PUFAs(5:1)以及n-6/n-3 PUFAs(1:1)喂养,以n-3 PUFAs缺乏为对照。持续喂养3个月后,麻醉状态下心脏取血,采集肝脏和脑组织。采用脂肪酸甲酯化法.气相色谱分析对血浆、肝和脑中的脂肪酸进行测定;实时荧光定量PCR技术测定肝脏和脑组织Δ6、Δ5去饱和酶的表达;肝脏和脑组织中的转录因子SREBP-1和PPAR-β的表达检测采用Western blotting进行。结果不同比例n-6/n-3 PUFAs饲料干预后,小鼠血浆、肝脏及脑组织中大多数脂肪酸均发生了显著性变化。与对照组相比,四组不同比例n-6/-3 PUFAs饲料喂养组血浆、肝脏及脑组织中的DHA含量明显增加,而AA含量降低;总饱和脂肪酸(∑SFAs)及∑n-6 PUFAs含量降低;总单不饱和脂肪酸(∑MUFAs)及∑n-3 PUFAs含量升高;同时花生四烯酸(从)/DHA比值以及∑n-6/∑n-3 PUFAs比值降低。通过分析发现,饲料中n-6/n-3 PUFAs变化对脑聚集DHA的影响存在着剂量-效应关系。进一步发现,在肝组织中,n-3 PUFAs饲料喂养组A6去饱和酶mRNA表达量较对照组显著降低;而在脑组织中,只有n-6/n-3PUFAs(1:1)组Δ5、Δ6去饱和酶的mRNA表达量较对照组显著降低。与对照组相比,n-6/n-3PUFAs(1:1)饲料组肝、脑组织细胞核中SREBP-1表达量明显减少(P<0.05),而肝、脑组织中PPAR-β的表达在各组之间未见显著性差异。结论通过饮食补充鱼油n-3 PUFAs是提升脑组织中DHA水平的有效方法,并存在剂量-效应关系。高含量n-3 PUFAs的摄入可以对脑中Δ6和Δ5去饱和酶以及SREBP-1的表达产生抑制作用。那么,饮食n-6/n-3 PUFAs保持何种比例,才能最大限度地满足脑的发育与功能需求,将是我们下一步的研究工作。

关键词：去饱和酶 DHA PUFAs n-6/n-3 SREBP 多不饱和脂肪酸

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CRP对血管内皮细胞泡沫化及IL-6、MCP-1表达的影响

CRP对血管内皮细胞泡沫化及IL-6、MCP-1表达的影响

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中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会

作者：朱琳何庆南陈光强胡量寇晓文易文中南大学湘雅二医院小儿肾脏病研究室

目的CRP(C-reactive protein)是非特异性炎症反应的最佳标志物之一,大量研究表明,CRP参与了血管损伤和硬化,但其确切作用机制尚不明确。本研究旨在探讨CRP对血管内皮细胞泡沫化及IL-6、MCP-1表达的影响。方法不同浓度的CRP(0mg/L、5mg/L... 详细信息

目的CRP(C-reactive protein)是非特异性炎症反应的最佳标志物之一,大量研究表明,CRP参与了血管损伤和硬化,但其确切作用机制尚不明确。本研究旨在探讨CRP对血管内皮细胞泡沫化及IL-6、MCP-1表达的影响。方法不同浓度的CRP(0mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L)与50mg/Lox-LDL同时作用于人脐静脉内皮细胞,体外培养24小时后,采用油红O染色法观察细胞泡沫化情况;采用ELISA方法测定细胞培养上清液中IL-6及MCP-1的浓度。结果①随着CRP浓度的增加,人脐静脉内皮细胞内脂滴数量逐渐增多,脂滴逐渐增大,分布面积变广,细胞皱缩更加明显,并有更多的细胞脱落,孔板内贴壁的细胞数量逐渐减少,细胞损伤以及细胞泡沫化的程度逐渐加重;②不同浓度CRP(5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L)和50 mg/Lox-LDL共同刺激24小时后,人脐静脉内皮细胞产生IL-6浓度分别为(33.90±2.64) mg/L、(40.77±3.62)mg/L、(42.19±3.82)mg/L和(44.16±0.57)mg/L,与单独50 mg/L ox-LDL培养的对照组(14.41 mg/L±3.38mg/L)比较,有显著性差异(P<0.05),IL-6水平呈CRP浓度依赖性增高的趋势,其中,40mg/LCRP刺激组IL-6水平是对照组的3倍(P<0.05)。5mg/LCRP刺激组与10mg/L、20mg/L、40mg/L CRP刺激组比较,IL-6水平亦有显著性差异(P<0.05),但10mg/L、20mg/L、40mg/LCRP刺激组间内皮细胞产生IL-6的量无显著性差异(P>0.05);③不同浓度CRP(5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L)和50mg/Lox-LDL共同刺激后,人脐静脉内皮细胞产生MCP-1浓度分别为(23.82±3.44)μg/L、(20.11±4.10)μg/L、(19.25±3.67)μg/L、(24.24±3.34)μg/L,与单独50mg/Lox-LDL培养的对照组(20.36μg/L±5.40μg/L)比较,无显著性差异(P>0.05)。结论高脂环境中,CRP能够显著促进血管内皮细胞泡沫化,直接参与血管内皮细胞的损伤过程,其机制可能主要是通过诱导血管内皮细胞合成和分泌IL-6、而非MCP-1途径启动高脂条件下的炎症级联放大反应,进而导致血管内皮细胞的损伤。

关键词： MCP-1 CRP LDL 人脐静脉内皮细胞不同浓度泡沫化

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低氧联合p38MAPK抑制剂SB203580对LPS诱导小鼠巨噬细胞TNF-α表达的影响研究

低氧联合p38MAPK抑制剂SB203580对LPS诱导小鼠巨噬细胞TNF-α表达...

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中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会

作者：刘奉琴王玉林 Paul KH Tam 山东大学附属省立医院儿科 Division of Paediatric Surgery Department of Surgery Li Ka Shing Faculty of MedicineThe University of Hong Kong

背景及目的儿科严重脓毒症(sepsis)和脓毒性休克(septic shock)仍处于高发病率、高病死率状态。前炎症细胞因子TNF-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是脓毒症和脓毒性休克发病的重要介质,巨噬细胞是脓毒症TNF-α产生的主要来源。p38... 详细信息

背景及目的儿科严重脓毒症(sepsis)和脓毒性休克(septic shock)仍处于高发病率、高病死率状态。前炎症细胞因子TNF-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是脓毒症和脓毒性休克发病的重要介质,巨噬细胞是脓毒症TNF-α产生的主要来源。p38 MAPK(mitogen-activated protein kinases)在TNF-α信号传导通路中占据重要地位。缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor 1,HIF-1)是哺乳动物和人体内细胞存在着一类介导低氧适应性反应的转录因子,它的氧调节亚单位HIF-1α仅在低氧状态表达。尽管脓毒症病人伴随低氧的病理状态,对TNF-α的产生是否与脓毒症低氧过程及HIF-1α诱导相关、氧浓度是否参与p38MAPK激活的报道较少见。本研究通过培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,观察在不同氧浓度状态下p38MAPK的活性和TNF-α分泌水平的改变,同时应用p38抑制剂SB203580进行干预,探讨低氧在TNF-α合成中的地位。在内毒素血症小鼠模型应用SB203580治疗,观察小鼠血清TNF-α水平和肺组织HIF-1α的表达,以期阐明低氧和HIF-1α在调节脓毒症TNF-α产生的作用机制及其与p38MAPK通路的关系。方法LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7,用SB203580和低氧(0.5% O2)及氯化钴(100μM)模拟低氧干预,ELISA检测细胞分泌TNF-α水平,Western blot检测p38 MAPK和下游底物MAPKAPK2 (p-MK2)蛋白表达,Real-time PCR检测TNF-αmRNA转录水平。用SB203580治疗LPS诱导BALB/c小鼠内毒素血症,ELISA检测小鼠血清TNF-α水平,RT-PCR、Real-time PCR、Western blot检测小鼠肺组织HIE-1α的表达。结果SB203580在正常氧浓度下可以完全抑制LPS诱导的RAW264.7细胞TNF-α产生(P<0.05,n=3),但是在低氧或者氯化钴模拟低氧状态下却失去这种抑制作用;低氧并不影响p38 MAPK的表达,而是增加了p-MK2的表达量:低氧提高了TNF-α转录水平,增加了TNF-αmRNA稳定性。SB203580对LPS诱导内毒素血症小鼠血清TNF-α水平没有明显影响(P>0.05,n=3),小鼠肺组织可以检测到HIF-1α的表达,SB203580对HIF-1αmRNA和蛋白的表达没有明显影响。结论本研究发现低氧可以增强LPS诱导的p38 MAPK的活性从而增加TNF-α的分泌。低氧通过HIF-1α介导TNF-α的生物合成,并且调节通路不受p38抑制剂的影响,可能与p38通路起到协同作用。为脓毒症的治疗提供了新的靶点和理论依据。

关键词：低氧状态 p38MAPK SB203580 LPS 细胞分泌内毒素血症 TNF 小鼠巨噬细胞 HIF 抑制剂

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人类免疫缺陷病毒-1B'亚型的R5嗜性毒株在疾病不同阶段的生物学特性

人类免疫缺陷病毒-1B'亚型的R5嗜性毒株在疾病不同阶段的生物学特...

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中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会

作者：郭艳芳马丽英袁林孙坚萍赵全壁屈水令黄洋邵一鸣张跃新中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心传染病预防控制国家重点实验室新疆医科大学第一附属医院

目的研究HIV-1感染者不同时期分离的R5毒株的生物学特性。方法采用传统的共培养方法分离并培养HIV-1,用表达CD4和趋化因子受体CCR5或CXCR4的GHOST-细胞系,测定病毒辅助受体的利用和感染性,从而判断所分离毒株的CCR5嗜型(R5型毒株);使用... 详细信息

目的研究HIV-1感染者不同时期分离的R5毒株的生物学特性。方法采用传统的共培养方法分离并培养HIV-1,用表达CD4和趋化因子受体CCR5或CXCR4的GHOST-细胞系,测定病毒辅助受体的利用和感染性,从而判断所分离毒株的CCR5嗜型(R5型毒株);使用2ng的P24病毒量感染正常人分离的外周血单个核细胞(PBMCs),ELISA法检测第1、3、5、7、10、15天的HIV-1 P24值,反映病毒复制能力:采用HIV-Ⅰ核酸荧光定量检测试剂盒测定血浆病毒载量。结果SIV-1B′亚型感染者22例,其中CD4>200/uL和CD4≤200/u L各为11例;所分离的病毒仅利用CCR5辅助受体,均为R5型毒株,感染性的结果显示,来自CD4≤200/uL的11株R5毒株的感染性为7.3927±4.5842,而CD4>200/uL的R5毒株感染性为2.6136±1.6105,统计学分析两组间有显著性差异(t=3.262,P<0.05);两组病毒复制能力在第7天开始明显上升,并在培养第7、10、15天,两组病毒复制动力学有明显的统计学差异(在感染的第7、10、15天,t值分别为3.771,2.509和2.260:P<0.05),CD4≤200/uL的R5毒株的复制能力较CD4>200/uL R5毒株的复制能力明显升高;CD4≤200/uL R5型毒株的病毒载量的对数值为5.6068±0.8151,CD4>200/uL R5毒株病毒载量对数值为4.7298±0.4316,两组病毒载量对数值差异有统计学意义(t=3.771,P<0.05)。结论疾病进展过程中,即使病毒的辅助受体利用没有从CCR5转变为CXCR4,但病毒的感染性和复制能力已有明显改变。

关键词：感染性复制能力感染者病毒载量 HIV 人类免疫缺陷病毒不同阶段生物学特性

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住院肺炎患儿不同血清型肺炎链球菌对抗菌药物的耐药性分析

住院肺炎患儿不同血清型肺炎链球菌对抗菌药物的耐药性分析

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中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会

作者：姚开虎邓力邓秋莲胡英惠俞桑洁沈叙庄杨永弘王立波赵根明郑跃杰赵瑞珍首都医科大学附属北京儿童医院 100045 广州市儿童医院 510120 复旦大学附属儿科医院 200032 复旦大学公共卫生学院 200032 深圳市儿童医院 518026

目的：了解当前从我国住院肺炎儿童分离的肺炎链球菌血清型分布和不同血清型菌株对抗菌药物的耐药状况，评估应用疫苗预防儿童肺炎链球菌感染和控制耐药菌传播的价值。方法：肺炎链球菌分离自在4家儿童医院呼吸科等住院治疗的年龄≤... 详细信息

目的：了解当前从我国住院肺炎儿童分离的肺炎链球菌血清型分布和不同血清型菌株对抗菌药物的耐药状况，评估应用疫苗预防儿童肺炎链球菌感染和控制耐药菌传播的价值。方法：肺炎链球菌分离自在4家儿童医院呼吸科等住院治疗的年龄≤5岁的肺炎儿童,采用荚膜肿胀试验进行血清型分析，E试验法检测菌株对青霉素、阿莫西林、头孢呋辛(钠)、头孢曲松、红霉素、万古霉素、氧氟沙星和亚胺培南等8种抗菌药物的敏感性。结果：279株肺炎链球菌中以19F型为最常见，占60.6％,其次为19A(9.7％)、23F(9.3％)和6B(5.4％)，7价结合疫苗(PCV7)覆盖率为81.0％，13价结合疫苗(PCVl3)的覆盖率为92.8％，PCV7在青霉素不敏感菌株和敏感菌株中的覆盖率分别为84.2％(202/240)和61.5％(24/39)。超过90％的19F和19A型菌株对青霉素不敏感，19F型以中介株为主(71.6％)，19A型以耐药株为主(55.6％)。19A型对青霉素和头孢呋新耐药率较为突出，无阿莫西林、头孢曲松或亚胺培南耐药株，但中介率高，甚至超过19F型对这几种抗菌药物的不敏感率。PCV7血清型菌株对青霉素、头孢呋新和阿莫西林的不敏感率和对头孢曲松和亚胺培南的耐药率较高;非PCV7血清型菌株对青霉素的耐药率较高;非PCV7血清型菌株对头孢曲松和亚胺培南无耐药株，但中介率高，超过PCV7血清型的不敏感率.以PCV13血清型分析，疫苗血清型菌株的耐药状况明显比非疫苗血清型菌株严重。结论：住院儿童肺炎病例分离的肺炎链球菌以19F、19A、23F和6B型常见;PCV7覆盖大多数肺炎链球菌;非PCV7血清型，尤其19A型，已有一定规模的流行，并具有较强耐药性。

关键词：儿童肺炎肺炎链球菌抗菌药物耐药性分析血清型分布

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含人MxA基因重组腺病毒抗乙型肝炎病毒作用的实验室研究

含人MxA基因重组腺病毒抗乙型肝炎病毒作用的实验室研究

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中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会

作者：许红梅毛国强黄琴赵瑞秋重庆医科大学儿童医院感染消化科

目的从健康中国人外周血单个核细胞中克隆人类MxA基因,应用腺病毒载体系统AdEasy system构建重组腺病毒质粒pAdMxA。研究重组腺病毒AdMxA体外抗HBV作用效果,为后续体内实验研究提供实验和理论基础。方法从健康中国人外周血单个核细胞中... 详细信息

目的从健康中国人外周血单个核细胞中克隆人类MxA基因,应用腺病毒载体系统AdEasy system构建重组腺病毒质粒pAdMxA。研究重组腺病毒AdMxA体外抗HBV作用效果,为后续体内实验研究提供实验和理论基础。方法从健康中国人外周血单个核细胞中提取总RNA,以总RNA为模板,根据GenBank中的MxA序列设计合成扩增MxA基因的特异性引物,进行RT-PCR反应扩增出目的基因。目的基因经纯化后定向克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,构建重组质粒pAdTrack-MxA,选取鉴定正确的克隆测序。扩增重组质粒pAdTrack-MxA,碱裂解法提取质粒,以PmeⅠ酶切使之线性化后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183细菌内进行同源重组以构建重组腺病毒质粒pAdMxA。重组腺病毒质粒pAdMxA经卡那霉素抗性鉴别和PacⅠ酶切确证,然后将pAdMxA以PmeⅠ线性化后转染入293细胞中包装成完整的重组腺病毒颗粒AdMxA,观察绿色荧光蛋白的表达并检测重组腺病毒AdMxA的感染滴度。进一步以重组腺病毒AdMxA的不同MOI转染HepG2.2.15细胞,利用RT-PCR方法检测HepG2.2.15细胞内MxA mRNA水平的表达。以重组腺病毒AdMxA的不同MOI转染HepG2.2.15细胞,利用ELASE方法检测HepG2.2.15细胞内HBsAg、HBeAg水平的变化。结果测序结果表明本实验从健康中国人PBMC中所克隆出的MxA基因,其序列与GenBank中人MxA基因序列同源性达99.75%,仅有5个碱基不同,且所编码的氨基酸仅1个发生改变,此氨基酸位于MxA蛋白的非功能区。所构建的重组腺病毒质粒pAdMxA经PacⅠ酶切后可见一条约4.5kb和另一条约30kb的条带,表明同源重组成功。重组腺病毒质粒pAdMxA经293细胞包装后可观察到绿色荧光,收获病毒并测定感染滴度为1.59×10～8(pfu/ml),具有较高感染效率。HepG2.2.15细胞经重组腺病毒AdMxA转染后,RT—PCR显示胞内MxA mRNA水平均较未转染对照组明显升高;胞内HBsAg、HBeAg水平均较未转染对照组明显降低,有统计学意义(P<0.05)。结论成功克隆了中国人MxA基因,并成功构建重组腺病毒AdMxA,重组腺病毒AdMxA感染靶细胞HepG2.2.15后其MxA mRNA表达水平明显升高,并能显著抑制Hep62.2.15中HBV的复制。以上表明重组腺病毒AdMxA有望成为一种有效的基因治疗方法。

关键词：重组腺病毒 HBeAg HBsAg MOI MxA 抗乙型肝炎病毒作用实验室研究

来源：评论

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Suppression subtractive hybridization analysis of gene expression during late kidney development identifies the developmentally regulated gene rPEA3

Suppression subtractive hybridization analysis of gene expre...

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中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会

作者： Songming Huang Aihua Zhang Qiuxia Chen Songzhou Xu Quanchen Feng Xirong Guo Mei Guo Ronghua Chen Department of Nephrology Affiliated Nanjing Children's HospitalNanjing Medical UniversityNanjingC Institute of Pediatrics Nanjing Medical UniversityNanjingChina

To gain insight into the later stages of nephrogenesis, we detected the alterations in gene expression in rat kidney at two postnatal stages, P0 (O day after birth), the time at which nephrogensis is still active, and P21 (21 days after birth),when nephrogenesis is complete. Methods Sprague Dawley rats were mated. Kidneys were dissected from embryos at E15, El7,and E19, and from postnatal days P0, P7, P21, and adult rats. Suppression subtractive hybridization (SSH) analysis was performedand highly expressed genes were evaluated as molecular markers by real-time reverse transcription--polymerase chain reaction(RT-PCR), in sitn hybridization, and Western Blot. Results Several differentially expressed genes were identified, includingrPEA3, a member of the PEA3 subfamily of Ets domain transcription factors. Real time RT-PCR analysis revealed that rPEA3 exhibited dynamic developmental regulation, with high levels of expression from embryonic day E15 until birth, and declining levelsthereafter. By in sire hybridization, rPEA3 mRNA was detected in the ureteric bud (UB) and surrounding metanephric mesenchymeof the kidneys from El5 until birth, but was undetectable in mature kidneys. Conclusions These studies provide compellingevidence that the newly identified gene rPEA3 may play an important role in kidney development and differentiation.

关键词： kidney gene rPEA3 gene expression suppression

来源：评论

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慢性活动性EB病毒感染外周血NK细胞、T淋巴细胞亚群变化特征的研究

慢性活动性EB病毒感染外周血NK细胞、T淋巴细胞亚群变化特征的研究

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中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会

作者：宋红梅邢燕吴晓燕王薇魏珉中国医学科学院北京协和医学院(清华大学医学院)北京协和医院儿科

目的慢性活动性EBV感染[chronic active Epstein-Barr virus（EBV）infection,CAEBV]于20世纪80年代由Tobi等首次报道,发病机制尚未明了,病毒抗原自身和宿主两方面的因素导致EBV免疫逃逸的机制在其发病中可能起重要作用。本文的目的是研... 详细信息

目的慢性活动性EBV感染[chronic active Epstein-Barr virus（EBV）infection,CAEBV]于20世纪80年代由Tobi等首次报道,发病机制尚未明了,病毒抗原自身和宿主两方面的因素导致EBV免疫逃逸的机制在其发病中可能起重要作用。本文的目的是研究CAEBV和急性EBV感染以及正常儿童外周血自然杀伤细胞（NK细胞）和T淋巴细胞亚群（包括功能亚群、激活亚群、原始记忆亚群和调节亚群）的变化特征,探讨CAEBV的发病机制与宿主细胞免疫功能（NK细胞和T细胞）的关系。方法研究对象为2004年3月至2008年4月在我院住院确诊为CAEBV患儿共11例,急性EBV感染（AEBV）儿童12例,以及正常非感染期儿童13例,分析其临床特征,并收集其外周血,应用PCR法检测EBV-DNA载量、磁珠分选细胞结合PCR法,原位杂交确定感染细胞类型、以及流式细胞仪检测NK细胞和T细胞亚群,包括原始T细胞、记忆T细胞以及激活亚群、功能亚群和调节亚群T细胞。结果CAEBV患儿外周血单个核细胞EBV-DNA水平明显高于急性感染组;7/9同时感染T细胞和NK细胞,219仅感染NK细胞,前者的临床表现较重且预后差而后者症状较轻。CAEBV组外周血白细胞总数、淋巴细胞、NK细胞、T细胞、CD4T细胞和CD8T细胞计数均较其他两组明显减低（P<0.01）,而B细胞的比例和计数与其他两组无差别。CAEBV组较AEBV组CD38CD8和DR+CD8细胞的比例均明显下降（P<0.01）,但较正常组升高（P<0.01）。CAEBV组CD4CD62LCD45RO效应记忆T细胞的比例和计数较正常组比例升高,但较AEBV组明显降低（P<0.05）,而CD4CD62LCD45RO中央记忆T细胞比例明显较其他两组升高（P<0.01）。CAEBV组CD8 CD62LCD45RA初始T细胞比例较正常组明显降低（P<0.01）,CD8CD62LCD45RA假初始T细胞比例较其他两组明显升高（P<0.01）,CD8CD62LCD45 RO中央记忆T细胞的比例较正常组明显升高（P<0.01）。结论CAEBV患者体内存在EB病毒的大量复制,而宿主NK细胞、T细胞、CD4T细胞、CD8T细胞、CD8CD38T细胞、CD4和CD8的初始和效应记忆T细胞的减少可能与CAEBV的慢性活动性有关,为我们更深入地了解CAEBV的发病机制和寻找治疗CAEBV的有效方法提供了重要依据。同时发现实时荧光定量PCR是临床上灵敏度和特异性均很高的诊断CAEBV的检测方法,临床检测EBV感染的不同的细胞类型对指导临床诊治和评估预后有重要意义。

关键词：慢性活动性细胞亚群 EBV 外周血病毒感染变化特征

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婴儿神经轴索营养不良的临床、神经病理及遗传学研究

婴儿神经轴索营养不良的临床、神经病理及遗传学研究

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中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会

作者：吴晔姜玉武高志杰王静敏熊晖常杏芝包新华张月华秦炯吴希如袁云肖江喜北京大学第一医院儿科北京大学第一医院神经内科北京大学第一医院医学影像科

目的婴儿神经轴索营养不良（infantile neuroaxonal dystrophy,INAD）是一种罕见的婴幼儿期起病的常染色体隐性遗传神经变性病,致病基因于2006年刚被确定。本研究对中国INAD患者的临床、神经病理以及遗传学特点进行分析,以期明确中国患... 详细信息

目的婴儿神经轴索营养不良（infantile neuroaxonal dystrophy,INAD）是一种罕见的婴幼儿期起病的常染色体隐性遗传神经变性病,致病基因于2006年刚被确定。本研究对中国INAD患者的临床、神经病理以及遗传学特点进行分析,以期明确中国患者的临床及遗传学独特性,为进一步在国内开展此病的准确分子诊断提供科学依据,从而为该病的遗传咨询及产前诊断打基础。方法对根据Nardocci等1999年所提标准,临床诊断为INAD的10例患儿进行如下分析:（1）临床特点:包括病史、神经系统体征、神经电生理及其头颅影像学检查;（2）神经病理:对其中4例患者进行皮肤、肌肉、腓肠神经活检;（3）遗传学分析:采用直接测序以及限制性内切酶酶切方法对10例患儿及其父母进行致病基因PLA2G6(编码胞浆非Ca依赖型磷脂酶A-VIA组,iPLA-VIA,cytosolic Ca-independent phospholipids *** VIA)的突变检测。结果（1）临床特征:起病年龄7月～2岁,发病前发育里程碑均正常,以智力运动发育停滞或倒退为首发症状,继之呈现快速进行性倒退,5例于病程2～5年发展至植物状态,体征均呈现痉挛性四肢瘫、锥体束征阳性,上述临床特点符合典型INAD表现;8例肌电图显示典型失神经支配特点,头颅影像学均显示明显小脑萎缩,3例伴侧脑室后角周围白质异常信号,3例伴广泛大脑皮层萎缩;（2）神经病理:4例行该检查者中3例皮肤或腓肠神经活检显示典型神经轴索球样扩张表现;（3）遗传学分析:共发现12种PLA2G6基因点突变,包括9种新突变和3种已知突变,9种新突变中包括6种错义突变（R39Q,V371M,G373R,K545E,R591W and A657V）、1种改变起始密码的突变（c.1A>G）、1种无义突变（RTOX）和1种剪切位点突变（IVSIO+1G>A）。结论中国INAD患者的临床表型与目前国外报道的其他患者基本一致,本研究发现的PLA2G6基因的9种新突变明显丰富了目前已知的突变谱（44种已知突变）,同时也提示了中国患者突变谱的独特性。较之既往的神经病理确诊依据,基因诊断为该病提供了新的无创性确诊方法,并为产前诊断打下了基础。

关键词：婴儿神经轴索营养不良肌电图无义突变神经病理神经变性病神经病理学痉挛性四肢瘫中国患者植物状态剪切位点突变肌肉活检失神经支配头颅影像学突变谱

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遗传性代谢病高危筛查诊断工作八年回顾(2000年～2008年)

遗传性代谢病高危筛查诊断工作八年回顾(2000年～2008年)

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中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会

作者：梁雁魏虹张敏侯凌张建玲罗小平华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科 430030

目的：遗传性代谢病种类繁多，虽单一病种发病率低，但总体罹患率高，且临床表现复杂多样，可累及全身多个器官系统，易误诊误治。遗传性代谢病通常有赖于生化或遗传学方法确定诊断，既往我国对此类疾病仅能作出初步诊断，或依靠将标本... 详细信息

目的：遗传性代谢病种类繁多，虽单一病种发病率低，但总体罹患率高，且临床表现复杂多样，可累及全身多个器官系统，易误诊误治。遗传性代谢病通常有赖于生化或遗传学方法确定诊断，既往我国对此类疾病仅能作出初步诊断，或依靠将标本送至国外实验室确诊。我们于2000年在国内率先独立建立了尿有机酸、氨基酸及其它代谢产物的GC-MS分析方法，并成立了全国性遗传代谢性疾病高危筛查诊断协作网络，采用滤纸收集尿液标本，系统开展了遗传性代谢缺陷病的高危筛查诊断工作，建立了适合我国国情的遗传性代谢病高危筛查诊断体系。本文将8年的临床工作进行总结，以期提高大家对遗传代谢病的认识。方法：应用高效液相色谱、气相色谱、气相色谱.质谱联用、细胞遗传学自动分析(包括荧光原位杂交)等技术，结合常规筛查、生化及酶学测定、病理和影像学检查等方法建立较完善的遗传性代谢病高危筛查诊断程序;对进行高危筛查病例进行回顾性分析。结果：(1)已有50余家大型医院加入全国性遗传代谢性疾病高危筛查诊断协作网络，在资源共享、优势互补、成果共用、共同提高的原则下，开展远程诊断工作，使我国遗传代谢病的诊治水平得到整体提高。(2)8年来共分析临床疑诊遗传代谢病患者血/尿标本6549例，其中：①血/尿有机酸分析5679例，发现异常782例(异常发现率为13.77％)，涉及遗传代谢病40余种，主要累及3岁以下婴幼儿。最常见的有机酸异常为：高乳酸血症、甲基丙二酸尿症、α-酮戊二酸尿症、苯丙酮尿症、二羧酸尿症、线粒体能量代谢障碍、酮症或解酮作用缺陷、酪氨酸血症、多种羧化酶缺乏症等。②诊断氨基酸代谢病41例，异常发现率为6.7％。其中苯丙酮尿症16例，全氨基酸尿症9例，酪氨酸血症5例，同型胱氨酸尿症3例，胱氨酸尿症2例，枫糖尿症2例，组氨酸血症、精氨酸血症、丙氨酸血症、瓜氨酸血症各1例。③血长链，极长链脂肪酸分析确诊肾上腺脑白质营养不良18例。(3)在本院遗传代谢病房住院患者中确诊的其他病例，包括糖原累积病28例，粘多糖病13例，Wilson病45例，Niematm Pick病4例，Gaucher病2例。结论：经8年遗传代谢病高危筛查，初步确定了我国高危人群中遗传代谢病疾病谱，对新生儿筛查特别是遗传代谢病筛查中的病种遴选提供了可靠资料。采用滤纸片收集血，尿标本更有利于遗传代谢病高危筛查工作的开展和远程诊断，适合目前我国国情。建立完善的遗传性代谢病筛查诊断体系，对于提高我国遗传代谢病研究领域整体水平十分重要。

关键词：遗传性代谢病新生儿筛查病种遴选基因诊断

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