目的分离鉴定导致一常染色体显性遗传腓骨肌萎缩症家系的致病基因,为基因诊断提供遗传学依据。方法利用全基因组扫查初步确定致病基因的区域,全外显子组测序发现候选基因变异,利用斑马鱼模型进行体内验证。结果全基因组扫查显示两处阳性区域(LOD score大于2),分别是2号染色体(171204750-173914775)和22号染色体(28866225-36418280)。结合全外显子组测序结果将致病基因确定为NEFH(c.3090ins G)。Sanger测序验证该突变与表型共分离。利用morpholino敲低斑马鱼同源基因的胚胎尾部出现不同程度地弯曲,运动能力明显降低,而且运动神经元轴突于背侧发出,在向腹侧延伸时出现截短和分叉。人野生型NEFH m RNA与MO共注射可以降低斑马鱼胚胎的畸形比例,而且轴突发育也恢复至由背侧至腹侧规律走行,但人突变型NEFH m RNA并没有逆转胚胎的异常表型。结论该CMT家系的致病基因是NEFH(c.3090ins G),其可能通过影响神经丝正常网状结构的形成,从而导致CMT发生。
目的对45例威廉姆斯综合征(Williams-Beuren Syndrome,WBS)疑似患者进行DNA拷贝数变异分析,明确其遗传缺陷。方法以45例WBS疑似患者为研究对象,经知情同意后采集每个先证者及其父母的外周血,提取基因组DNA,应用Affymetrix Genome Wide Human SNP Array 6.0芯片与荧光定量PCR检测患者及其父母的基因组DNA拷贝数情况,用短串联重复序列结合变性聚丙烯酰胺凝胶电泳明确发生缺失突变染色体的亲本来源。结果全基因组SNP芯片的拷贝数分析结果显示:所有45例患者在染色体7q11.23的区域均发生杂合性缺失。其中42例患者缺失范围约1.5Mb,3例患者缺失范围约1.8Mb。选取缺失区域内的两个单拷贝基因,在WBS核心家系中进行定量PCR,结果显示:患者均存在该基因的缺失而父母不携带缺失突变。缺失亲本来源分析的结果中,缺失突变来自父源的有23例,母源的有19例,比例约为1,说明突变的发生不存在遗传偏倚。结论采用人类全基因组SNP芯片结合荧光定量PCR可以对临床疑诊WBS的患儿进行遗传检测,为临床明确诊断、指导治疗及遗传咨询提供依据。
目的特发性中枢性性早熟(idiopathic central precocious puberty,ICPP)是由于下丘脑-垂体-性腺轴的提前激活,从而导致患儿青春期提前的疾病。表现为女性8岁前,男性9岁前的第二性征发育。ICPP可呈家族性发病,女性发病率显著高于男性。...
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目的特发性中枢性性早熟(idiopathic central precocious puberty,ICPP)是由于下丘脑-垂体-性腺轴的提前激活,从而导致患儿青春期提前的疾病。表现为女性8岁前,男性9岁前的第二性征发育。ICPP可呈家族性发病,女性发病率显著高于男性。目前有可靠证据支持其突变致病的基因包括KISS1,KISS1R,MKRN3。本研究通过对ICPP患者的三个候选基因进行突变检测,以确定其是否为中国人ICPP的常见致病因素。方法本研究收集了11例发病年龄为1-7岁的中国散发ICPP患儿外周血样本,进行基因组DNA提取。通过PCR-Sanger测序对其KISS1,KISS1R,MKRN3基因全部外显子及外显子-内含子邻接区域进行测序并筛查序列突变;通过荧光实时定量PCR,对三个候选基因进行拷贝数检测。结果通过对三个候选基因的PCR-Sanger测序及荧光实时定量PCR检测,未发现可能致病的罕见序列变异或拷贝数变异。结论 KISS1,KISS1R,MKRN3突变可能并非中国人ICPP的常见致病原因,提示ICPP有较强的遗传异质性,尚有其它遗传致病机制待阐明。
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