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作者

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隐形矫治替牙期儿童上颌横向发育不足的研究

隐形矫治替牙期儿童上颌横向发育不足的研究

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中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第14次口腔生物医学学术年会中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第18次口腔病理学术年会

作者：卢兰昕张灵玲卢燕勤湖南中南大学湘雅口腔医院

目的:近年来Invisalign First成为替牙期儿童矫治的新装置。但目前少有First治疗替牙期上颌横向发育不足的研究,且没有自然生长组来排除发育的影响。本研究拟以自然生长组为对照,评价First扩弓治疗对替牙期牙和牙槽骨的影响,为临床医生... 详细信息

目的:近年来Invisalign First成为替牙期儿童矫治的新装置。但目前少有First治疗替牙期上颌横向发育不足的研究,且没有自然生长组来排除发育的影响。本研究拟以自然生长组为对照,评价First扩弓治疗对替牙期牙和牙槽骨的影响,为临床医生选择合适的扩弓方式提供指导。方法:按照纳入、排除标准筛选,First组和自然生长组各纳入17名患者。在基线和六个月随访时,在数字化牙模上测量尖牙间宽度、第一前磨牙间宽度、第二乳磨牙间宽度、第一恒磨牙间宽度、牙弓周长、牙弓深度、尖牙间牙槽骨宽度、磨牙间牙槽骨宽度和磨牙倾斜度。组内采用配对t检验,组间采用两样本独立t检验。结果:自然生长组在6个月内所有指标均无显著差异(p>0.05)。First组内治疗后尖牙间宽度、第一前磨牙间宽度、第二乳磨牙间宽度、第一恒磨牙间宽度、尖牙间牙槽骨宽度和磨牙间牙槽骨宽度增加(p<0.05)。治疗后First组内牙弓周长和磨牙颊倾增加,牙弓深度减少(p<0.05)。First组尖牙间宽度、第一前磨牙间宽度、第二乳磨牙间宽度、第一恒磨牙间宽度、尖牙间牙槽骨宽度和磨牙间牙槽骨宽度比自然生长组扩宽(p<0.05)。结论:First能有效治疗替牙期上颌牙弓发育不足。轻度至中度上颌横向发育不足的患者,First可能是一个舒适合理的选择,但其骨性扩弓效应有待进一步CBCT等研究结果证实。

关键词： Invisalign First System 上颌扩弓自然生长替牙期

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PTCH1基因单核苷酸多态性与中国宁夏人群的非综合征性唇裂相关

PTCH1基因单核苷酸多态性与中国宁夏人群的非综合征性唇裂相关

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中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第14次口腔生物医学学术年会中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第18次口腔病理学术年会

作者：阮文彦迟丹丹王宇萌马坚黄永清宁夏医科大学口腔医院军事口腔医学国家重点实验室口腔疾病国家临床医学研究中心陕西省口腔医学重点实验室第四军医大学口腔医学院口腔生物学教研室&口腔遗传病与罕见病门诊宁夏口腔疾病研究重点实验室宁夏颅颌面畸形研究重点实验室宁夏医科大学总医院口腔医院口腔颌面外科

目的:探讨宁夏回族自治区PTCH1单核苷酸多态性(SNP)与非综合征性唇腭裂(NSCL/P)的关系,并通过生物信息学分析预测单核苷酸多态性的功能。方法:对宁夏地区非综合征性唇腭裂患者和正常人群PTCH1基因上的31个单核苷酸多态性位点进行病例对... 详细信息

目的:探讨宁夏回族自治区PTCH1单核苷酸多态性(SNP)与非综合征性唇腭裂(NSCL/P)的关系,并通过生物信息学分析预测单核苷酸多态性的功能。方法:对宁夏地区非综合征性唇腭裂患者和正常人群PTCH1基因上的31个单核苷酸多态性位点进行病例对照分析(504例病例和455例对照),探讨PTCH1基因多态性与非综合征性唇腭裂的关系。通过病例-对照实验筛选出具有统计学意义的单核苷酸多态性位点,进一步通过3DSNP数据库对相关的转录因子、三维空间相关的单核苷酸多态性位点等信息进行分析,最后通过NCBI数据库分析相应的转录因子与唇腭裂的关系。结果:病例对照研究显示,31个SNP位点中有5个SNP位点rs357564(P=0.0233)、rs1805155(P=0.0371)、rs28446116(P=0.0408)、rs2282041(P=0.0439)、rs56119276(P=0.0256)的等位基因频率在病例组和对照组中的差异具有统计学意义;生物信息学分析显示与rs28446116相关的转录因子中EP300和RUNX3可能与非综合征型唇腭裂的发生有关。结论:PTCH1基因与宁夏地区非综合征型唇腭裂的发生可能存在相关性,其中rs28446116位点可能更具有研究意义。

关键词： PTCH1 非综合征性唇腭裂生物信息学分析转录因子

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唾液腺腺泡细胞癌中NR4A3基因重排及NOR-1蛋白表达分析

唾液腺腺泡细胞癌中NR4A3基因重排及NOR-1蛋白表达分析

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中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第14次口腔生物医学学术年会中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第18次口腔病理学术年会

作者：王敏钱佳骏薛俊青顾挺胡宇华陈颖夏荣辉上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海交通大学医学院附属第九人民医院病理科

目的:探讨NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达在唾液腺腺泡细胞癌中的表达情况及在鉴别诊断中的价值。方法:收集2020年5月至2024年2月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科诊断的唾液腺癌119例,包括腺泡细胞癌(acinic cell carcin... 详细信息

目的:探讨NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达在唾液腺腺泡细胞癌中的表达情况及在鉴别诊断中的价值。方法:收集2020年5月至2024年2月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科诊断的唾液腺癌119例,包括腺泡细胞癌(acinic cell carcinoma,AciCC)63例,黏液表皮样癌(mucoepidermoid carcinoma,MEC)31例,分泌性癌(secretory carcinoma,SC)25例。分别使用荧光原位杂交和免疫组织化学染色检测NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达情况。结果:AciCC主要发生于大唾液腺。与MEC和SC相比,AciCC显著好发于女性患者(P=0.006)。NR4A3基因重排在AciCC、MEC和SC中的阳性率分别为76.2%(48/63)、0%(0/10)和0%(0/7)。NOR-1蛋白表达在AciCC、MEC和SC中的阳性率分别为92.1%(58/63)、9.7%(3/31)和0%(0/25),差异具有显著统计学意义(P<0.001)。单独使用NR4A3基因重排诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为76.2%和100%。单独使用NOR-1蛋白表达诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为92.1%和94.6%。联合使用NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为96.8%和94.6%,曲线下面积为0.896,诊断价值最优。结论:AciCC好发于女性患者,主要发病部位为大唾液腺。NR4A3基因重排仅见于AciCC中,在诊断工作中具有100%的特异性,但敏感性较低。NOR-1蛋白表达检测具有很好的灵敏度和特异度,可作为鉴别AciCC、MEC和SC的初筛和替代方法。联合使用NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达检测具有最优的诊断价值。

关键词：腺泡细胞癌唾液腺 NR4A3 基因重排 NOR-1 蛋白表达

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基于深度学习模型识别头颈鳞癌肿瘤间质比

基于深度学习模型识别头颈鳞癌肿瘤间质比

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中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第14次口腔生物医学学术年会中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第18次口腔病理学术年会

作者：陶文杰孙宝孙晶晶顾子悦周榕夏荣辉李江上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔-颌面头颈肿瘤科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所

研究目的:世界卫生组织(WHO)第五版《头颈部肿瘤分类》首次将肿瘤间质比(Tumor-Stroma Ratio,TSR)作为口腔和舌部癌症的病理特征预后因素,但如何评估TSR需要耗费病理医生大量时间和精力。目前人工智能(AI)深度学习算法在医学病理图像分... 详细信息

研究目的:世界卫生组织(WHO)第五版《头颈部肿瘤分类》首次将肿瘤间质比(Tumor-Stroma Ratio,TSR)作为口腔和舌部癌症的病理特征预后因素,但如何评估TSR需要耗费病理医生大量时间和精力。目前人工智能(AI)深度学习算法在医学病理图像分析方面有着巨大的潜力和优势,可以提高肿瘤诊断和预后评估的效率和准确性。本研究将深度学习技术应用于识别头颈鳞癌(HNSCC)TSR,并评估其预后价值。研究方法:1.数据收集和预处理:收集HNSCC病理图像(WSI),筛选出本研究中心(N=200例)和TCGA-HNSCC数据库(N=200例),随机分组为训练集(N=150例),验证集(N=150例),测试集(N=100例),并完成患者临床信息(如年龄、性别、分期等)和生存数据收集,将WSI转换为数字图像,并进行预处理,包括图像增强、归一化等。***-Net模型构建:基于前期预实验筛选和比较不同模型分割效果,使用细胞核分割辅助病理组织分割的多注意力网络框架对WSI进行组织分割,将图像中的肿瘤组织、间质组织和背景等不同区域进行分割和标记。TSR-Net模型是由一个解码器和三分支解码器组成的,使用EfficientNet-B4作为特征提取网络,解码器使用Deeplabv3plus的上采样部分Deeplabv3+,每个解码器使用了不同的注意力机制。同时使用Hovernet生成的伪标签去监督网络。***计算和预后评估:根据TSR-Net计算TSR,通过生存分析和COX回归分析,评估TSR在HNSCC预后价值,并将其与传统病理组织学因素进行比较。研究结果:本研究成功构建TSR-Net可用于识别HNSCC的TSR,模型总体Dice相似系数为0.96,肿瘤组织Dice相似系数为0.89,间质组织Dice相似系数为0.92。研究结论:TSR-Net可以有效识别并计算HNSCC的TSR比例,为临床病理提供更加快速、准确的辅助诊断方法,为进一步的治疗价值的研究提供研究基础。本研究也为人工智能在口腔医学领域的应用提供了有益的探索和实践经验。

关键词：深度学习头颈鳞癌肿瘤间质比预后评估

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Shh基因转导通过微血管保护和调控氧化应激减轻IR诱导的唾液腺损伤

Shh基因转导通过微血管保护和调控氧化应激减轻IR诱导的唾液腺损伤

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中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第14次口腔生物医学学术年会中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第18次口腔病理学术年会

作者：胡美君范志朋单兆臣首都医科大学附属北京口腔医院全牙再生与功能重建重点实验室首都医科大学附属北京口腔医院外科门诊

目的:阐明1)Shh基因转导在辐照(IR)诱导的小型猪腮腺损伤模型中的保护作用,2)Hh信号通路在体内和体外激活的可能机制。方法:构建小型猪腮腺放射损伤模型,放疗后4周通过腮腺导管逆行转导Ad-Rat Shh及GFP基因。在放疗前2周开始每2周检测... 详细信息

目的:阐明1)Shh基因转导在辐照(IR)诱导的小型猪腮腺损伤模型中的保护作用,2)Hh信号通路在体内和体外激活的可能机制。方法:构建小型猪腮腺放射损伤模型,放疗后4周通过腮腺导管逆行转导Ad-Rat Shh及GFP基因。在放疗前2周开始每2周检测腮腺唾液流率变化,并于IR后5周和20周采集腮腺组织进行组织学检查。Masoon染色法检测腮腺纤维化程度,PAS染色法检测糖原水平,TUNEL染色法检测细胞凋亡水平。通过IF、IHC或Western blotting检测Hh通路和血管生成相关标志物(VEGF和CD31)和氧化应激相关标志物(p-H2AX、Nrf2和NOX4)的表达。建立人脐静脉血管内皮细胞HUVECs放射模型(10Gy/次),制备了稳定的shh过表达细胞系,观察了内皮细胞的增殖、衰老、凋亡和血管生成情况。结果:小猪体内表达Shh基因可部分恢复腮腺唾液流速,降低纤维化程度,维持唾液腺微血管。Shh的过表达可以成功激活人脐血管内皮细胞(HUVECs)的Hh信号通路,促进内皮细胞增殖,上调VEGF和CD31蛋白的表达。Hh通路激活可减轻IR诱导的唾液腺组织和内皮细胞氧化应激和DNA损伤的上调。p53表达降低,细胞凋亡率降低。在IR前应用ML385(一种Nrf2抑制剂)可以通过抑制VEGF和CD31的表达来抵消内皮细胞活化的保护作用。结论:Shh基因的表达可有效减轻IR诱导的微型猪腮腺损伤,Hh通路的抗氧化应激和微血管保护作用受Nrf2调控。

关键词：电离辐射 Hedgehog途径唾液腺(SG)损伤氧化应激微血管

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口腔上皮来源的CPNE7在牙周组织再生的作用

口腔上皮来源的CPNE7在牙周组织再生的作用

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中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第14次口腔生物医学学术年会中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第18次口腔病理学术年会

作者：白圣峰金岩 Joo Cheol Park 首尔大学口腔组织与发育生物学教研室空军军医大学第三附属医院组织工程研发中心

目的:牙周组织由牙槽骨,牙周膜与牙骨质形成。牙周膜是存在于牙槽骨和牙骨质之间的结缔组织,牙周膜纤维具有排列性,牙周膜细胞通过细胞骨架重组,以形态学极化的形态平行排列与牙周膜纤维周围。牙周膜以Sharpey’s fiber的形式一端附着... 详细信息

目的:牙周组织由牙槽骨,牙周膜与牙骨质形成。牙周膜是存在于牙槽骨和牙骨质之间的结缔组织,牙周膜纤维具有排列性,牙周膜细胞通过细胞骨架重组,以形态学极化的形态平行排列与牙周膜纤维周围。牙周膜以Sharpey’s fiber的形式一端附着于牙槽骨,另一端附着于牙骨质。在牙周再生的生物学研究领域中,其组织结构往往被忽略。牙周炎、牙齿脱落复位等情况下牙周膜组织结构受到破坏之后很难恢复其原有的形态结构。本研究拟利用牙周组织发育过程的分子互作为基础,探讨牙周组织受损后的再生效果。材料与方法:本研究利用牙周组织发育过程中口腔上皮的作用为基础,筛选到口腔上皮来源物质CPNE7。通过PCR,Western Blot与免疫荧光验证了CPNE7对牙周膜干细胞的细胞骨架重组的作用与机制。通过启动子活性分析,PCR与Western Blot分析CPNE7对CAP的调控。通过Live-cell imaging观察CPNE7对细胞的排列移动行为。在破骨细胞诱导过程中处理CPNE7,通过PCR与Western Blot分析破骨细胞活化行为。在小鼠的牙脱落再植模型与比格犬的三壁缺损模型中验证CPNE7对牙周再生的作用。并在体内验证细胞骨架调节蛋白TAU与牙骨质附着蛋白CAP的表达。并制作CPNE7的肽链,验证其对牙周组织再生的作用。结果与结论:在牙周膜细胞中处理CPNE7后,发现CPNE7表达与F-actin共定位并诱导微管向细胞伪足向的延伸,然而ACTIN和α-tubulin的蛋白表达并没有变化。TAU与ACTIN和α-tubulin共定位,随着CPNE7的处理后TAU的蛋白表达增高。CPNE7对破骨细胞的生物学活性无影响。在小鼠牙齿脱落复位模型中处理CPNE7可恢复附着良好并有纤维排列的牙周膜固有结构并高表达TAU。CPNE7与CPNE7肽链增加了CAP的启动子活性、基因表达以及蛋白表达,并在犬的牙周三壁缺损模型中促进了牙周组织结构的修复。根据结果可提示CPNE7并非通过破骨细胞的生物学行为,而可能通过TAU促进牙周膜的纤维排列,并通过直接上调牙周膜细胞中CAP的表达,促进牙周组织的再生。

关键词： cpne7 细胞骨架重组牙周膜纤维排列牙周膜的附着 tau

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人骨髓间充质干细胞成骨分化过程中全基因组DNA甲基化测序分析

人骨髓间充质干细胞成骨分化过程中全基因组DNA甲基化测序分析

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中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第14次口腔生物医学学术年会中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第18次口腔病理学术年会

作者：曹杨杨范志朋首都医科大学附属北京口腔医院

目的:骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化过程中受到表观遗传修饰调节,但DNA甲基化修饰在BMSCs成骨分化中的具体作用尚不清楚。本研究在BMSCs成骨分化第7天的关键过渡点评估了未诱导和成骨诱导BMSCs全基因组水平的甲基化修饰模式谱及差异... 详细信息

目的:骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化过程中受到表观遗传修饰调节,但DNA甲基化修饰在BMSCs成骨分化中的具体作用尚不清楚。本研究在BMSCs成骨分化第7天的关键过渡点评估了未诱导和成骨诱导BMSCs全基因组水平的甲基化修饰模式谱及差异。材料与方法:成骨诱导液诱导BMSCs;EZ-96 DNA甲基化芯片分析未分化及成骨分化BMSCs全基因组DNA甲基化修饰图谱;UCSC联合分析全基因组水平甲基化修饰模式、GO富集及KEGG通路富集信息。结果:成骨分化第7天时,BMSCs成骨分化过程中全基因组平均DNA甲基化水平增加,甲基化位点集中分布于差异基因(DMGs)的CpG位点的胞嘧啶上;相关转录因子平均DNA甲基化水平增加,转录因子甲基化CpG位点主要呈现中-高甲基化修饰状态,差异基因(DMGs)CpG位点主要呈现高度甲基化修饰状态;筛查出472个成骨相关差异基因(DMGs)和186,156个成骨分化高甲基化基因位点;GO条目分析显示成骨过程中差异基因(DMGs)主要集中于细胞骨架蛋白结合、骨骼发育、MSCs分化等主要条目;KEGG分析表明成骨过程中差异基因(DMGs)与WNT信号通路、肌醇磷酸代谢途径、可卡因途径高度相关。结论:本研究对BMSCs成骨分化中全基因组平均甲基化水平、关键转录因子、成骨相关差异基因(DMGs)和具体DNA甲基化分布图谱进行了描述;报道了差异基因(DMGs)富集的GO条目及KEGG通路。本研究揭示了BMSCs成骨分化过程中全基因组甲基化水平的差异图谱,并为BMSCs分化中表观遗传机制的深入研究提供了详实可用信息。

关键词：骨髓干细胞(BMSCs) 成骨分化全基因组 DNA甲基化测序

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增殖性化脓性口炎一例及文献综述

增殖性化脓性口炎一例及文献综述

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中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第14次口腔生物医学学术年会中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第18次口腔病理学术年会

作者：揭伟萍胡济安李怡宁浙江大学医学院附属口腔医院病理科浙江大学口腔医学院浙江省口腔疾病临床医学研究中心浙江省口腔生物医学研究重点实验室浙江大学癌症研究院口腔生物材料与器械浙江省工程研究中心

目的:探讨增殖性化脓性口炎的临床病理特征、诊断及鉴别诊断。材料与方法:患者女性,24岁,主诉:右下后牙牙龈溃疡2周。现病史:患者2周前自觉右下后牙牙龈溃疡,后出现小水疱,水疱破溃,无明显疼痛不适;于当地医院就诊,行抗病毒药物治疗,自... 详细信息

目的:探讨增殖性化脓性口炎的临床病理特征、诊断及鉴别诊断。材料与方法:患者女性,24岁,主诉:右下后牙牙龈溃疡2周。现病史:患者2周前自觉右下后牙牙龈溃疡,后出现小水疱,水疱破溃,无明显疼痛不适;于当地医院就诊,行抗病毒药物治疗,自觉无明显缓解。专科检查:46、47颊侧前庭沟黏膜稍突起,呈鹅卵石样外观,伴不规则溃疡面,触诊质软,触痛(-)。右下前后牙唇颊侧牙龈及前庭沟黏膜可见散在大面积点状糜烂面。11,21唇侧牙龈见数处点状糜烂。结果:大体:鲜红色黏膜组织一块,大小1.0cm*0.5cm*0.2cm,黏膜表面可见糜烂,切面质软。镜下:黏膜表面不全角化,棘层增生,棘层细胞水肿、空泡性变,棘层松解,上皮钉突肥大,黏膜局部溃疡,上皮内多灶性嗜酸性粒细胞浸润为主的微脓肿形成,固有层大量嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润,毛细血管增生。直接免疫荧光检查结果:上皮棘层细胞:IgG(-),IgA(-),IgM,C3(-),纤维蛋白原(±);基底膜区:IgG(-),C3(-),IgM(-),IgA(-),纤维蛋白原(-)。病理诊断:增殖性化脓性口炎。结论:增殖性化脓性口炎(pyostomatitis vegetans,PSV)是一种罕见疾病。PSV临床特点为:口腔黏膜充血红肿,表面多发粟粒性无菌性针尖样脓疱,部分脓疱可连续排成线状,破溃后形成直径2-3mm的糜烂或浅溃疡,被覆黄白色假膜,高出黏膜表面,部分病损融合,形成典型蜗牛轨迹样外观。口腔黏膜还可见颗粒样病损、赘生物或鹅卵石样外观。PSV患者外周血嗜酸性粒细胞增多,血沉增高。PSV的组织学表现为:上皮内或上皮下大量嗜酸性粒细胞和中性粒细胞浸润而形成微脓肿,微脓肿破裂形成溃疡。PSV需与复发性阿弗他溃疡、白塞综合征、增殖型天疱疮进行鉴别诊断。PSV治疗效果取决于能否有效控制肠道疾病,控制良好者口腔和皮肤病损均可治愈;口腔治疗首先局部糖皮质激素;无效者可以选择全身糖皮质激素治疗;氨苯砜、长效磺胺等可做为二线治疗药物,但需警惕其不良反应。PSV是炎症性肠病的高度特异性标志,对疑似PSV患者应建议进行肠道检查。

关键词：增殖性化脓性口炎病理诊断

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靶向丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1通过影响溶酶体发生与自噬限制头颈鳞癌的进展

靶向丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1通过影响溶酶体发生与自噬限制头...

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中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第14次口腔生物医学学术年会中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第18次口腔病理学术年会

作者：曲艺韩正学秦力铮首都医科大学附属北京口腔医院口腔颌面头颈肿瘤科

目的:前体mRNA的异常选择性剪接产生有利于肿瘤进展的致病性mRNA亚型,在此过程中发挥关键作用的剪接因子被视为重要的潜在抗癌靶点。SRSF1作为最早被发现的剪接因子,在多种癌症类型中呈高表达水平,发挥促癌作用。然而,SRSF1在头颈鳞癌... 详细信息

目的:前体mRNA的异常选择性剪接产生有利于肿瘤进展的致病性mRNA亚型,在此过程中发挥关键作用的剪接因子被视为重要的潜在抗癌靶点。SRSF1作为最早被发现的剪接因子,在多种癌症类型中呈高表达水平,发挥促癌作用。然而,SRSF1在头颈鳞癌发生、发展中的作用与机制尚未阐明。方法:收集临床样本,评估肿瘤组织中SRSF1的表达水平与患者预后的相关性;构建过表达/敲低SRSF1细胞模型及裸鼠移植瘤模型,采用包括CCK8、EdU染色、克隆形成、Transwell侵袭等实验明确SRSF1对头颈鳞癌表型的调控作用;采用转录组学检测SRSF1下调后几种头颈鳞癌细胞的共同差异基因;检测不同分组头颈鳞癌细胞内溶酶体酶的活性,利用荧光染料对不同分组细胞溶酶体进行标记示踪,分析溶酶体数量与形态的改变;转染荧光标记腺相关病毒联合蛋白印迹检测不同分组头颈鳞癌细胞自噬通量的改变;构建体内外挽救模型,明确SRSF1调控头颈鳞癌进展的关键机制。结果:SRSF1在肿瘤组织内呈高表达水平,且其表达情况与头颈鳞癌患者预后呈负相关;靶向敲低SRSF1抑制头颈鳞癌的生长、克隆形成、侵袭和瘤体生长,反之,SRSF1过表达促进相关表型;在KEGG上富集SRSF1下调后的共同差异基因,发现溶酶体生物发生和自噬相关通路被显著富集;SRSF1Low头颈鳞癌细胞内溶酶体生成数量减少,溶酶体酶CTSD和NAGLU的合成与活性均显著降低;多种自噬相关基因在SRSF1下调后显著激活,此外p62和LC3B-II蛋白明显积累;激光共聚焦显微镜下观察到靶向敲低SRSF1能够促进自噬小体的堆积,抑制自噬溶酶体的形成;在体内外利用瞬时转染TFEB质粒或添加Baf A1构建挽救模型验证上述结果。结论:SRSF1在临床上具有成为头颈鳞癌患者预后标志物的潜力,靶向下调SRSF1通过抑制溶酶体的生物发生与功能,抑制肿瘤细胞正常自噬过程中溶酶体与自噬小体的融合,进而限制头颈鳞癌的生长与进展。

关键词：头颈鳞癌溶酶体生物发生自噬剪接因子

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颌骨骨膜干细胞微环境解析及仿生材料设计

颌骨骨膜干细胞微环境解析及仿生材料设计

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中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第14次口腔生物医学学术年会中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第18次口腔病理学术年会

作者：刘志超叶鑫王慧明俞梦飞浙江大学医学院附属口腔医院

目的:临床上由于肿瘤、损伤、感染等原因导致的下颌骨骨缺损非常多见,下颌骨骨缺损往往伴随着骨膜的缺失,而骨膜的缺失往往会使骨缺损区域形成纤维性愈合,因此骨膜对于骨缺损的愈合至关重要,但骨膜复杂的生理结构导致下颌骨仿生骨膜的... 详细信息

目的:临床上由于肿瘤、损伤、感染等原因导致的下颌骨骨缺损非常多见,下颌骨骨缺损往往伴随着骨膜的缺失,而骨膜的缺失往往会使骨缺损区域形成纤维性愈合,因此骨膜对于骨缺损的愈合至关重要,但骨膜复杂的生理结构导致下颌骨仿生骨膜的构建仍然具有挑战性,本研究希望基于颌骨骨膜干细胞微环境解析从机制上探究骨膜内外层作用的本质,从而构建仿生骨膜。材料与方法:构建成年小鼠下颌骨骨缺损模型,运用micro-CT、苏木精-伊红(HE)、Masson染色、免疫荧光染色、PCR、蛋白定量和转录组测序等方式探究小鼠下颌骨缺损后不同阶段骨愈合的表型变化;同时探究骨缺损后骨膜中干细胞群体随着时间迁移的变化、骨缺损周围区域干细胞增殖情况及骨缺损修复区域干细胞迁移情况;体外构建适合培养下颌骨骨膜细胞和成纤维细胞的共同培养基,将下颌骨骨膜细胞及成纤维细胞培养后的上清液互相交换作用后,探究两种细胞上清液对细胞作用的影响,通过细胞成骨诱导、细胞增殖、细胞免疫荧光染色、细胞黏附实验、细胞迁移测试、EDU染色、CCK8、PCR、蛋白定量等方法进行体外细胞学表征。结果:在小鼠下颌骨缺损模型中,在骨膜、骨缺损周围区域及新生骨质中干细胞群体分布具有特异性。成纤维细胞培养后的上清液可以促进骨膜细胞的增殖、迁移及成骨能力;骨膜细胞培养后的上清液可以抑制成纤维细胞的增殖、黏附及迁移能力。结论:本研究对颌骨骨膜内层促进成骨作用、外层阻挡软组织的两种功能本质进行探究,通过解析下颌骨骨膜干细胞微环境从机制上解析骨膜功能及结构的产生原因。骨膜细胞可以抑制成纤维细胞的增殖、迁移、黏附能力,验证了骨膜屏障作用的生物学因素,成纤维细胞可促进骨膜细胞的增殖与成骨能力,针对骨膜阻挡作用的生物学因素的揭示也有望为临床仿生下颌骨骨膜的构建提供一种新策略。

关键词：仿生骨膜颌骨再生组织工程

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