目的:合成负载丹酚酸B(salvianolic acid b,SalB)和ALA的脂质体纳米颗粒nano-SalB-ALA,确定SalB和ALA最佳浓度配比,探索其用于光动力治疗口腔白斑病的增效作用及机制。方法:采用薄膜水合法合成不同浓度配比的nano-SalB-ALA;分别通过CCK-8实验、细胞活死染色实验、DCFH-DA探针探究其对口腔白斑细胞和舌癌细胞的增殖、活力和活性氧产量的影响;建立小鼠舌背白斑模型,验证nano-SalB-ALA用于光动力治疗白斑的增效作用,并进一步通过DHE探针和免疫组化法探究增效作用的机制。结果:10 mg SalB@250 u M ALA(nano-SalB10-ALA250)为nano-SalB-ALA的最佳浓度配比;nano-SalB10-ALA250光动力治疗可抑制口腔白斑细胞和舌癌细胞的增殖活力,增加细胞内活性氧产量;nano-SalB10-ALA250光动力治疗14天后小鼠舌白斑评分降低,白斑缺氧微环境中糖酵解相关的PI3K/AKT/mTOR通路中PI3K、AKT、m TOR、Hif-1α、VEGF、GLUT1水平均降低,活性氧含量显著改变(P<0.05)。结论:丹酚酸B可通过协调活性氧水平,抑制糖酵解相关的PI3K/AKT/mTOR通路,降低其下游的缺氧诱导因子Hif-1α和葡萄糖转运蛋白GLUT1表达,改善缺氧微环境,从而提高ALA光动力治疗口腔白斑病的疗效。
目的:研究ppp3cc对口腔扁平苔藓来源的树突状细胞(DC)信号通路的免疫调控作用。方法:取分离纯化的Lin-HLA-DR+树突状细胞,按照是否干扰ppp3cc表达分为siRNA组、siRNA阴性组和空白对照组,siRNA组设置不同转染浓度梯度。阻断实验分为两组,一组加入NF-κB信号通路关键分子抑制剂,另一组不加抑制剂,观察NF-κB信号通路阻断后,检测DC相关信号分子的改变,进一步验证该信号通路在细胞信号传导中的作用。使用LPS诱导DC成熟。分别在24小时、48小时节点收集细胞,Annexin V/PI凋亡试剂盒标记细胞后流式细胞仪上机检测细胞凋亡情况;PCR检测各组ppp3cc m RNA的表达。Western-blot检测NF-κB等信号通路差异。结果:与空白对照组相比,抑制ppp3cc及阻断NF-κB信号通路后,DC凋亡加快。抑制ppp3cc导致NF-κB信号通路受到抑制,PCR结果显示当ppp3cc转录减少50%时,对NF-κB的抑制作用达到峰值,之后趋于稳定。结论:该体外研究表明了抑制ppp3cc表达能够抑制NF-κB信号通路,随着ppp3cc表达的减少,其抑制作用逐渐增强并趋于稳定。
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