(目的)本研究旨在探讨热应激对H9c2心肌细胞构成型HSP70(Constitutive or Cognate HSPs,Hsc70)出入核及细胞凋亡的影响。(方法)以体外高温(42℃)作为热应激模型温度,通过转染Hsc70 si RNA抑制Hsc70表达,Western blot检测检测细胞浆和细...
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(目的)本研究旨在探讨热应激对H9c2心肌细胞构成型HSP70(Constitutive or Cognate HSPs,Hsc70)出入核及细胞凋亡的影响。(方法)以体外高温(42℃)作为热应激模型温度,通过转染Hsc70 si RNA抑制Hsc70表达,Western blot检测检测细胞浆和细胞核内Hsc70表达,ELISA检测细胞培养液LDH浓度,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。(结果)结果表明,正常H9c2心肌细胞浆Hsc70表达量较高,细胞核中表达量很低,细胞浆和细胞核Hsp72表达量非常低;热应激后细胞浆Hsc70表达量无显著差异,而细胞核Hsc70热应激100 min后极显著升高(P <0.01),热应激240min后开始降低;细胞浆和细胞核Hsp72热应激后极显著升高(P <0.01)。Hsc70抑制表达后,细胞浆Hsc70水平显著降低,热应激后Hsc70入核明显减少,但仍然有入核现象;Hsc70抑制表达对细胞浆和细胞核Hsp72表达无显著影响。与热应激组相比,热应激+Hsc70 si RNA组LDH表达量呈升高趋势,热应激100 min两组出现显著差异(P <0.05);Hsc70抑制表达后H9c2细胞在热应激后更容易发生凋亡,而且在热应激30 min和100 min内,两组之间存在显著差异(P <0.05)。(结论)结果提示,热应激可诱使Hsc70出入细胞核,Hsc70抑制表达后热应激诱导Hsc70入核显著降低,细胞损伤加重,细胞凋亡升高。
A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)感染可导致人类和动物的急性上呼吸道感染,病毒的快速传播以及较高的发病率和致死率给公共健康造成了极大的威胁.A型流感病毒除了引发严重的肺部损伤之外,还会引起包括胃肠道、胰腺等其他组织的全身...
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A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)感染可导致人类和动物的急性上呼吸道感染,病毒的快速传播以及较高的发病率和致死率给公共健康造成了极大的威胁.A型流感病毒除了引发严重的肺部损伤之外,还会引起包括胃肠道、胰腺等其他组织的全身性系统性疾病.有研究表明,血管内皮细胞表面可同时表达SAα-2,3Gal和SAα-2,6Gal,提示这可能是造成流感病毒引起多器官感染的主要原因.因此,本研究选用大鼠肠粘膜微血管内皮细胞(RIM-MVECs),采用免疫荧光染色和透射电镜法探讨IAV对其否具有感染性,并进行相关研究.H1N1和H5N1这两种亚型A型流感病毒均可感染RIM-MVECs，并在其内进行复制，释放出具有感染性的子代病毒粒子。其中，H1N1亚型流感病毒的复制效率要高于H5N1这亚型，表现出对RIM-MVECs细胞较高的易感性。
建立一种快速、特异、敏感的鸡沙门氏菌与奇异变形杆菌检测方法.根据Gen Bank中已发表的禽源致病性沙门氏菌和奇异变形杆菌基因组序列,采用Primer Express5.0软件分别设计一对特异引物,沙门氏菌扩增片段279bp,奇异变形杆菌扩增片段395bp,以SYBR Green I为扩增产物荧光染色剂,建立一种具有特异性、敏感性,且能快速检测鸡沙门氏菌与奇异变形杆菌双重SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,并进行反应体系的优化、敏感性分析、特异性验证、重复性试验,并用临床组织样本对该方法的特异性进行检测.经双重SYBR Green I荧光定量PCR方法进行检测，特异性扩增曲线，走向一致，熔解曲线趋于一致。说明该方法敏感性高、特异性强、重复性好，可用于禽源致病性沙门氏菌与奇异变形杆菌快速监测和早期临床诊断。
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